ADN polymerase

Bài viết này trình bày về một qui trình đơn giản để biểu hiện và tinh sạch ADN polymerase tái tổ hợp có nguồn gốc từ vi khuẩn ưa nhiệt Thermus aquaticus và thử nghiệm chế phẩm “hotstart”.

9p jangni2 19-04-2018 86 3   Download

Bài giảng Sinh học phân tử: Sao chép ADN gồm có những nội dung chính sau: Đại cương ADN, cơ chế sao chép ADN, thí nghiệm Meselson & Stahl, phản ứng sao chép, các yếu tố tham gia, ADN polymerase, các bước sao chép, sao chép ở E. coli,... Mời các bạn cùng tham khảo.

38p youcanletgo_03 13-01-2016 381 72   Download

ARN polymerase và khởi đầu phiên mã Trình tự khởi đầu phiên mã (promoter) của một gen bao gồm điểm bắt đầu phiên mã (tức là nucleotit ở đó sự tổng hợp ARN thực sự bắt đầu) và phần mở rộng thường nằm ngược dòng hàng chục nucleotit kể từ điểm bắt đầu phiên mã. Ngoài chức năng là vị trí liên kết của ARN polymerase và xác định điểm bắt đầu phiên mã, promoter còn có vai trò xác định mạch nào trong hai mạch của chuỗi xoắn kép ADN được dùng làm khuôn. Một số phần của promoter...

6p butmauvang 29-08-2013 129 8   Download

Các thành phần phân tử của phiên mã ARN thông tin, phân tử mang thông tin từ ADN tới bộ máy tổng hợp protein của tế bào, được phiên mã từ mạch làm khuôn của một gen. Một enzym được gọi là ARN polymerase có thể tách hai mạch ADN của chuỗi xoắn kép và lắp ráp các nucleotit ARN dọc theo mạch ADN làm khuôn dựa trên nguyên tắc kết cặp giữa các bazơ nucleotit.

3p butmauvang 29-08-2013 95 4   Download

Các kỹ thuật phân tích protein 1. Chuẩn bị dịch chiết tế bào để tinh sạch protein Việc phân lập và tinh sạch được các loại protein riêng rẽ có ý nghĩa quyết định đến khả năng tìm hiểu được chức năng của chúng. Mặc dù trong một số trường hợp, chúng ta có thể nghiên cứu chức năng của protein ở dạng hỗn hợp phức tạp, nhưng phần lớn những nghiên cứu này thường dẫn đến những kết luận “mù mờ”. Chẳng hạn như khi chúng ta nghiên cứu về hoạt tính của một enzym ADN polymerase trong một hỗn...

15p butmauvang 29-08-2013 137 21   Download

Kary Mullis mô tả 1983 (Cetus Corporation) 1985: Xuất hiện trên tạp chí “Science” Đạt Nobel Prize hóa học 1993 Polymerase Chain Reaction (PCR) là phản ứng khuếch đại một đoạn ADN bằng enzym polymerase, thực hiện trong ống nghiệm, có độ nhạy rất cao.

49p lumia_12 19-07-2013 99 18   Download

Bệnh Hemophilia A liên quan đến các đột biến trên gen mã hóa cho yếu tố đông máu số VIII. Vent ADN polymerase có khả năng xúc tác tổng hợp ADN mới chính xác hơn so với Taq ADN polymerase. Mục tiêu: Xác định qui trình phát hiện đột biến ở intron 18 và 19 của gen mã hóa cho yếu tố đông máu số VIII sử dụng Vent ADN polymerase trong kỹ thuật PCR - RFLP. Phương pháp: Phản ứng chuỗi PCR và cắt enzyme giới hạn RFLP. Kết quả: Phát hiện được 16 trên 29 mẫu bệnh nhân Hemophilia A có đột...

5p sunshine_3 28-06-2013 91 15   Download

Được phát triển bởi Pål Nyrén và Mostafa Ronaghi tại Royal Institute of Technology, Thụy Điển, năm 1996 Dựa vào phát hiện sự phóng thích pyrophosphate khi nucleotide được gắn vào Thành phần phản ứng: ADN sợi đơn Mồi Các enzym: DNA polymerase, ATP sulfurylase, luciferase và apyrase, Các cơ chất adenosine 5´ phosphosulfate (APS) và luciferin

21p htc_12 16-05-2013 184 30   Download

HBV thuộc loại siêu vi trùng (hay vi rút ) Hepadna với khả năng tồn tại cao. HBV bền vững với nhiệt độ :100 độ C virut sống được 30', ở -20 độ C sống tới 20 năm, HBV kháng ete (eter), nhưng bất hoạt trong formalin(fócmon). Xét nghiệm máu có thể có 3 loại HBV với kích thước cỡ 22nm, 42nm và 22-200nm. Kháng nguyên HBcAg chỉ có ở virut kích thước 42nm. Trong máu bệnh nhân có cả hạt nhiễm và không nhiễm (virion).Các hạt không nhiễm không có genom của virus (dsADN)nên không có khả năng gây bệnh. Nồng...

27p phamthanhnhahien 06-01-2013 155 16   Download

Taq ADN polymerase (Taq) là enzym xúc tác cho phản ứng tổng hợp ADN được tách ra từ loài vi khuẩn ưa nhiệt Thermus aquaticus và đã được nghiên cứu khá kỹ về tính chất [1, 2, 3]. Thậm chí gen của Taq đã được nhân dòng và biểu hiện thành công trong E. coli [3]. Nhờ tính chất bền với nhiệt, hoạt tính polymerase và khả năng bổ sung gốc adenosin (A) vào đầu 3’ của chuỗi ADN dạng sợi kép nên sau khi được phát hiện, Taq đã trở thành công cụ hết sức hữu ích của các nghiên cứu sinh học phân...

8p tuanloc_muido 11-12-2012 114 9   Download

Các cơ quan khoa học tại đây đã khuyến cáo nông dân thực hiện nhiều biện pháp thiết thực để phòng trị bệnh Greening trên cây có múi. Trước hết, nông dân có thể đưa các mẫu lá cây nhiễm bệnh đến Viện nghiên cứu và phát triển công nghệ sinh học, Đại học Cần Thơ nhờ chẩn đoán, phát hiện sớm bệnh trong vài ngày sau khi cây bị nhiễm bệnh. Cơ quan này ứng dụng kỹ thuật PRC (Polymerase Chain Reaction) lấy mẫu lá nhiễm bệnh (màu lốm đốm vàng hoặc lá non), sau đó trích ADN từ...

2p nkt_bibo45 14-02-2012 106 10   Download

DNA polymerase (ADN polymeraza) là một enzyme tham gia chính vào quá trình nhân đôi DNA. Những enzyme này xúc tác cho quá trình polymer hóa các deoxiribonucleotide dựa trên trình tự của một chuỗi DNA khác. Sợi DNA mới được tạo thành sẽ bổ sung với sợi DNA khuôn theo nguyên tắc bổ sung. KỸ THUẬT PCR (Polymerase chain reaction-Phản ứng chuỗi polymerase) PCR là chữ viết tắt của cụm từ Polymerase Chain Reaction, được dịch ở một vài sách là Phản ứng chuỗi trùng hợpcũng có sách gọi là "phản ứng khuếch đại gen". ...

5p thiuyen11 07-09-2011 579 32   Download

Giai đoạn khởi động Các nhân tố tham gia khởi động: TF II D: nhận biết & gắn vào vị trí khởi động ở promoter TF II A: gắn vào TF II D TF II B giúp ARN-polymerase gắn vào phứchợp TF II A – TF II D TF II F gắn ARN-polymerase vào promoter TF II E cho phép khởi động sự phiên mã TF II H: sử dụng helicase để tách ADN và sửa sai ADN 1 ATP sử dụng để tách 2 mạch đơn

5p poseidon01 15-07-2011 132 19   Download

DIỄN TIẾN QUÁ TRÌNH SAO CHÉP ADN Giai đoạn kết thúc • Mồi ARN bị phân hủy bởi RNAse H. • Các lỗ hổng sẽ được lấp lại nhờ ADN polymerase I. • Enzym ligase nối tất cả các chỗ gián đoạn. Mô hình trên E. coli DIỄN TIẾN QUÁ TRÌNH SAO CHÉP ADN Sữa sai trong sao chép • ADN polymerase I và III có 2 hoạt tính: polymer hóa và exonuclease 5’-3’ và 3’-5’ • Trên đường di chuyển, nếu gặp Nu lắp sai, ADN polymerase sẽ lùi lại cắt bỏ theo hướng 3’-5’...

5p poseidon01 15-07-2011 195 46   Download

QUÁ TRÌNH PHIÊN MÃ Nguyên tắc chung • Chỉ thực hiên trên 1 mạch ADN • ARN được tổng hợp theo hướng 5’ – 3’ nhờ tác dụng của enzym ARN polymerase phụ thuộc ADN QUÁ TRÌNH PHIÊN MÃ Nguyên tắc chung PHIÊN MÃ Ở PROKARYOTE Giai đoạn khởi động • ARN polymerase nhận biết và gắn vào trình tự khởi động trên mạch khuôn nhờ nhân tố khởi động (: sigma)

5p poseidon01 15-07-2011 167 40   Download

SINH TỔNG HỢP ADN: SỰ TỰ NHÂN ĐÔI ADN Các điều kiện xãy ra • Các liên kết H2 giữa hai mạch phải bị phá vở • Phải có đủ 4 loại deoxyribonucleotide triphosphate (dATP, dTTP, dGTP, dCTP) • Phải có đoạn mồi (primer) để bắt cặp với mạch khuôn • Tổng hợp trên mạch khuôn diễn ra theo hướng 3’  5’ • Có sự tham gia của nhiều Enzyme đặc hiệu: Topoisomerase,helicase, ADN polymerase I và III, ligase; và một số protein đặc hiệu khác ...

5p poseidon01 15-07-2011 142 35   Download

Haemophilia A (bệnh máu khó đông) là một trong những bệnh di truyền phổ biến liên quan đến nhiễm sắc thể X. Ước tính trên thế giới có khoảng từ 1/5000 đến 1/10.000 các bé trai sinh ra mắc bệnh này.

16p phalinh6 09-07-2011 56 10   Download

Kỹ thuật PCR (viết tắt từ chữ Polymerase Chain Reaction), hay còn gọi là phản ứng tổng hợp dây chuyền nhờ polymerase hoặc phản ứng chuỗi tổng hợp ADN, do Karl Mullis và cộng sự phát minh năm 1985. Kỹ thuật PCR đã đưa lại một cuộc cách mạng trong di truyền phân tử, khuếch đại in vitro có chọn lọc bằng tạo dòng in vitro mà không cần sự hiện diện của tế bào, khắc phục được nhược điểm thao tác phức tạp và cần thời gian dài của kỹ thuật tạo dòng in vivo. Nhờ phản ứng PCR,...

30p truongthiuyen11 08-07-2011 235 77   Download

+ Topoizomerase làm nhiệm vụ mở xoắn của ADN làm cho phân tử ADN duỗi thẳng ra. + Helicase làm nhiệm vụ phân huỷ các liên kết hydro để tách 2 chuỗi polynucleotide rời nhau ra. + AND - ligase làm nhiệm vụ nối các đoạn AND - okasaki lại. + ARN - polymerase (primase) xúc tác tổng hợp đoạn ARN mồi. - Các loại protein: tham gia tái sinh ADN có nhiều loại protein đặc hiệu như protein SSB, protein Dna .... 12.2.2. Cơ chế tái sinh ADN Quá trình tái sinh ADN ở procariote xảy ra qua ba...

17p iiduongii9 09-05-2011 184 42   Download

Đặt vấn đề: Thất bại trong điều trị nhiễm HBV bằng lamivudine là do virus có đột biến gần và/hay ngay tại YMDD chính là vị trí tác động thuốc trên gene polymerase của HBV. Có 4 đột biến giúp HBV kháng lamuvidine đã được chứng minh; đó là rtV173L, rtL180M, rtM204I/V, và rtV207I. Mục tiêu nghiên cứu: Xây dựng kỹ thuật giải trình tự để định genotype HBV và phát hiện đột biến YMDD kháng lamivudine của HBV...

7p giangduongykhoa 07-05-2011 183 22   Download