ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI<br />
TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN<br />
---------------------<br />
<br />
NGUYỄN MẠNH HÙNG<br />
<br />
ĐÁNH GIÁ ĐA DẠNG SINH HỌC VI SINH VẬT LIÊN KẾT VỚI HẢI MIÊN TẠI<br />
VÙNG BIỂN ĐÀ NẴNG VIỆT NAM THÔNG QUA NGHIÊN CỨU METAGENOMICS<br />
BẰNG KỸ THUẬT 16S rRNA MISEQ SEQUENCING.<br />
<br />
LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC<br />
<br />
Hà Nội – Năm 2016<br />
<br />
ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI<br />
TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN<br />
---------------------<br />
<br />
NGUYỄN MẠNH HÙNG<br />
<br />
ĐÁNH GIÁ ĐA DẠNG SINH HỌC VI SINH VẬT LIÊN KẾT VỚI HẢI MIÊN TẠI<br />
VÙNG BIỂN ĐÀ NẴNG VIỆT NAM THÔNG QUA NGHIÊN CỨU METAGENOMICS<br />
BẰNG KỸ THUẬT 16S rRNA MISEQ SEQUENCING.<br />
Chuyên ngành: Vi sinh vật học<br />
Mã số: 60420107<br />
<br />
LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC<br />
<br />
NGƢỜI HƢỚNG DẪN KHOA HỌC:<br />
PGS.TS. NGUYỄN THỊ KIM CÚC<br />
TS. PHẠM ĐỨC NGỌC<br />
<br />
Hà Nội – Năm 2016<br />
<br />
Lời cam đoan.<br />
Tôi xin cam đoan kết quả thể hiện trong bản luận văn này là công trình nghiên cứu thực<br />
tế. Toàn bộ số liệu, kết quả nghiên cứu trong luận văn là hoàn toàn trung thực, khách<br />
quan, chƣa đƣợc công bố công khai bởi một ai khác.<br />
<br />
Lời cảm ơn.<br />
Đề tài này là kết quả của một quá trình học tập và nghiên cứu khoa học của bản thân,<br />
cùng với sự giúp sức của rất nhiều cá nhân và tập thể.<br />
Để có đƣợc thành công này, tôi xin bày tỏ lòng kính trọng và biết ơn sâu sắc đến<br />
PGS.TS. Nguyễn Thị Kim Cúc, ngƣời đã giúp tôi rất nhiều bằng chính sự tâm huyết và<br />
đam mê với lĩnh vực nghiên cứu khoa học.<br />
Tôi cũng xin đƣợc tỏ lòng cảm ơn chân thành tới các cán bộ thuộc phòng Công nghệ<br />
sinh học, viện Hoá sinh biển; Viện nghiên cứu khoa học Miền Trung, Viện Hàn lâm<br />
khoa học Việt Nam đã có những hỗ trợ, đóng góp, tƣ vấn rất nhiệt tình giúp tôi hoàn<br />
thiện đề tài.<br />
Tôi thật sự rất biết ơn ngƣời thân, bạn bè và đồng nghiệp đã giành tình cảm, đặt niềm<br />
tin, hỗ trợ, động viên; đồng thời cũng là nguồn động lực to lớn góp phần giúp tôi hoàn<br />
thiện đề tài này. Với sự hỗ trợ về kiến thức; các nguồn dữ liệu bổ sung; các công trình<br />
nghiên cứu khoa học có liên quan ở trong nƣớc và trên thế giới-Tập thể các Thầy cô<br />
thuộc khoa sinh học; Bộ môn Vi sinh vật học và đặc biệt TS Phạm Đức Ngọc đã giúp<br />
tôi làm nên sự thành công của đề tài này.<br />
Tôi xin chân thành cảm ơn!<br />
Hà Nội, ngày 27 tháng 12 năm 2016.<br />
<br />
Nguyễn Mạnh Hùng<br />
<br />
MỤC LỤC<br />
MỞ ĐẦU .......................................................................................................................... 8<br />
CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN ............................................................................................ 9<br />
1.1.<br />
<br />
Sơ lƣợc về hải miên ............................................................................................ 9<br />
<br />
1.2.<br />
<br />
Vai trò và tầm quan trọng của vi sinh vật liên kết với hải miên....................... 12<br />
<br />
1.3.<br />
<br />
Đa dạng sinh học vi sinh vật liên kết với hải miên........................................... 18<br />
<br />
1.4.<br />
<br />
Sơ lƣợc về gen 16S rRNA ................................................................................ 23<br />
<br />
1.5.<br />
<br />
Sơ lƣợc về MiSeq Sequencing.......................................................................... 24<br />
<br />
CHƢƠNG 2: VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨUError! Bookmark not<br />
defined.<br />
2.1 VẬT LIỆU ............................................................ Error! Bookmark not defined.<br />
2.2. PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU ....................... Error! Bookmark not defined.<br />
2.2.1 Tách DNA ...................................................... Error! Bookmark not defined.<br />
2.2.2 Thiết kế thƣ viện 16S rRNA cho MiSeq ........ Error! Bookmark not defined.<br />
2.2.3 Phân tích thƣ viện 16S rRNA ......................... Error! Bookmark not defined.<br />
CHƢƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN ................ Error! Bookmark not defined.<br />
3.1 KẾT QUẢ ............................................................. Error! Bookmark not defined.<br />
3.1.1. Tách DNA metagenome của vi sinh vật liên kết hải miênError! Bookmark<br />
not defined.<br />
3.1.2. Khuếch đại vùng siêu biến V4 của gen 16S rRNA và gắn barcodes .... Error!<br />
Bookmark not defined.<br />
3.1.3. Đa dạng các cộng đồng vi sinh vật liên kết hải miên biển Đà Nẵng..... Error!<br />
Bookmark not defined.<br />
3.2 THẢO LUẬN ....................................................... Error! Bookmark not defined.<br />
<br />