Môi trường nuôi cấy tế bào thực vật

Chia sẻ: Nguyen AAA | Ngày: | Loại File: PDF | Số trang:4

Thêm vào BST

Báo xấu

438
lượt xem 44
download

Download Vui lòng tải xuống để xem tài liệu đầy đủ

Mặc dù nhu cầu dinh dưỡng của các loại mô nuôi cấy là rất khác nhau nhưng môi trường nuôi cấy mô thực vật đặc trưng chứa các thành phần sau: - Các nguyên tố đa lượng. Bao gồm các loại muối của nitrogen, potassium, calcium, phosphorus, magnesium và sulfur. Đây là sáu nguyên tố chính cần thiết cho sinh trưởng của thực vật bậc cao. - Các nguyên tố vi lượng. Bao gồm các loại muối của sắt, kẽm, mangan, boron, copper, molybdenum và cobalt ở dạng vết. - Các phụ gia hữu cơ. ...

Chủ đề:

Bình luận(0) Đăng nhập để gửi bình luận!

Lưu

Nội dung Text: Môi trường nuôi cấy tế bào thực vật

Môi trường nuôi cấy tế bào thực vật Mặc dù nhu cầu dinh dưỡng của các loại mô nuôi cấy là rất khác nhau nhưng môi trường nuôi cấy mô thực vật đặc trưng chứa các thành phần sau: - Các nguyên tố đa lượng. Bao gồm các loại muối của nitrogen, potassium, calcium, phosphorus, magnesium và sulfur. Đây là sáu nguyên tố chính cần thiết cho sinh trưởng của thực vật bậc cao. - Các nguyên tố vi lượng. Bao gồm các loại muối của sắt, kẽm, mangan, boron, copper, molybdenum và cobalt ở dạng vết. - Các phụ gia hữu cơ. Một lượng nhỏ các loại vitamin (myo-inositol, thiamine, nicotinic acid, pyridoxine, riboflavin…), các amino acid (thường cho phép bỏ qua nhưng trong một số trường hợp đặc biệt thì có thể dùng), và các phụ gia hữu cơ không xác định khác (malt, dịch chiết nấm men, dịch thủy phân casein, nước dừa…). - Các chất kích thích sinh trưởng thực vật. Thành phần phụ gia quan trọng nhất quyết định kết quả nuôi cấy là các chất điều hòa sinh trưởng. Các auxin (IAA và các dạng tương tự được tổng hợp nhân tạo như 2,4-D, NAA, IBA, NOA…), và các cytokinin (zeatin, 2i-P và các dạng tương tự được tổng hợp
nhân tạo như kinetin, BA…) là những nhóm chất kích thích sinh trưởng và phát sinh hình thái chủ yếu trong nuôi cấy mô và cơ quan của thực vật. - Nguồn carbon. Thường sử dụng sucrose làm nguồn carbon thay cho nguồn carbon được thực vật cố định từ khí quyển bằng quang hợp. Trong đa số các thí nghiệm nuôi cấy, tế bào thực vật đã mất khả năng quang hợp. Glucose cũng thường được đưa vào môi trường và cho hiệu quả tương đương sucrose, trong khi fructose cho hiệu quả kém hơn. - Các tác nhân làm rắn (tạo gel) môi trường. Thường sử dụng là agar, một loại polysaccharide thu được từ một số loài tảo thuộc ngành tảo đỏ (Rhodophyta). Một số hợp chất khác cũng được thử nghiệm thành công như alginate, phytagel, methacel và gel-rite. Murasghige và Skoog (1962) đã xây dựng môi trường dinh dưỡng cơ bản (gọi là môi trường MS) thích hợp cho hầu hết các thí nghiệm nuôi cấy tế bào thực vật. Thành phần môi trường nuôi cấy Murashige và Skoog (1962). Thànhphần Nồngđộ Thànhphần Nồngđộ (mg/L) (mg/L)
1.Các nguyên tố đa FeSO4.7H2O 27,8 lượng Na2EDTA.2H2O 370 37,3 MgSO4.7H2O 170 KH2PO4 1900 KNO3 3.Nguồn carbon 1650 NH4NO3 Sucrose 440 30000 CaCl2.2H2O 2.Các nguyên tố vi 4.Các phụ gia hữu cơ lượng -Các vitamin H3BO3 Thiamine.HCl 0,5 Pyridoxine.HCl MnSO4.4H2O 6,2 Nicotinicacid 0,5 ZnSO4.7H2O myo-inositol Na2MoO4.2H2O 22,3 0,5 CuSO4.5H2O 8,6 100 CoCl2.6H2O 0,25 KI -Các chất khác 0,025
0,025 Glycine 2 0,83