Đề tài: Nghiên cứu biểu hiện gen mã hóa kháng nguyên GP 120 của virus HIV phân type B lưu hành tại Việt Nam

Chia sẻ: | Ngày: | Loại File: PPTX | Số trang:44

Thêm vào BST

Báo xấu

145
lượt xem 25
download

Download Vui lòng tải xuống để xem tài liệu đầy đủ

Triomune-30( or -40);Mỗi viên nén chứa: Stavudine 30 mg(or 40 mg); Lamivudine 150 mg; Nevirapine 200 mg.Cả hai stavudine và lamivudine hoạt động bằng cách chấm dứt sự tăng trưởng của các chuỗi DNA và sao chép các ức chế ngược của HIV. Nevirapine là một non-nucleoside ức chế sao chép ngược. Nó hoạt động bằng cách sao chép ngược trực tiếp ức chế. Amantadine: Tác dụng ở giai đoạn 1, tức là ức chế sự hòa nhập virus vào bên trong tế bào ký chủ. Ribavirin: Tác dụng ở giai đoạn 2, tức là ức chế virus (đặc biệt virus cúm) tổng...

Chủ đề:

Bình luận(0) Đăng nhập để gửi bình luận!

Lưu

Nội dung Text: Đề tài: Nghiên cứu biểu hiện gen mã hóa kháng nguyên GP 120 của virus HIV phân type B lưu hành tại Việt Nam

KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP
Đề tài: Nghiên cứu biểu hiện gen mã hóa kháng nguyên GP 120 của virus HIV phân type B lưu hành tại Việt Nam Người hướng dẫn : PGS.TS Đinh Duy Kháng Sinh viên : Phạm Thu Trang
Tình hình HIV trên thế giới 2009
• Ước tính đến năm 2011, Việt Nam có khoảng 311.500 người bị nhiễm bệnh. • Tại Việt Nam tính đến ngày 31/12/2010 • 183.938 người • 44.938 người • 49.477 người
Phân bố các phân type HIV-1 M theo vùng địa lý (2008)
Glycoprotein gp 120
Glycoprotein vỏ gp 120 của virus HIV
Phức hợp gp120-CD4-đồng thụ thể
VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
Vật liệu • Plasmid mang gen gp120 của virus HIV phân type B lưu hành ở Việt Nam (mẫu số 6, Quảng Ninh) được tách dòng thành công tại Phòng Vi sinh vật học phân tử - Viện CNSH - Viện KH&CN VN. • Các hóa chất, sinh phẩm và trang thiết bị tại Phòng Vi sinh vật học phân tử - Viện CNSH - Viện KH&CN VN.
Phương pháp nghiên cứu • Nhân bản gen mã hóa protein gp120B của virus HIV bằng phương pháp PCR. • Gắn sản phẩm PCR vào vector. • Biến nạp DNA plasmid vào tế bào E.coli. • Cắt DNA bằng enzyme giới hạn. • Xác định trình tự gen bằng máy giải trình tự gen tự động • Biểu hiện gen trong tế bào E.coli tái tổ hợp. • Tinh sạch protein tái tổ hợp bằng cột ái lực Ni2+ .
KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
Thiết kế vector biểu hiện pET32a(+) mang gen gp120B
Khuếch đại gen gp120B_EX bằng cặp mồi biểu hiện
Tạo vector tái tổ hợp pET32a(+) mang gen gp120B_EX • ĐC1: Thang DNA chuẩn 1 kb. • ĐC 1: Plasmid gốc • ĐC2-6: Các dòng plasmid 3, 4, 8, 10, 12 cắt bằng BamH I và Xho I vector pET32a(+) • ĐC7: Đối chứng (đoạn gen • gp120B_EX)
Tinh sạch DNA plasmid ĐC1-3: Tương ứng với dòng plasmid tái tổ hợp số 4, 10, 12
Gen gp120B_EX trong vector biểu hiện pET32a(+) đã được giải trình tự
Kiểm tra khung đọc của gen gp120B trong vector pET32a(+)
Biểu hiện gen gp120B trong vi khuẩn E.coli chủng BL21 StarTM (DE3) ĐC 1: Thang Protein chuẩn ĐC 2,4: Mẫu không cảm ứng ĐC 3,5: Mẫu cảm ứng bằng IPTG 1mM