Thức ăn chăn nuôi - Xác định hàm lượng chlotetracycline, oxytetracycline và tetracycline bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao

Chia sẻ: Tran Anh Phuong | Ngày: | Loại File: DOC | Số trang:11

Thêm vào BST

Báo xấu

285
lượt xem 61
download

Download Vui lòng tải xuống để xem tài liệu đầy đủ

Tham khảo tài liệu 'thức ăn chăn nuôi - xác định hàm lượng chlotetracycline, oxytetracycline và tetracycline bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao', nông - lâm - ngư, nông nghiệp phục vụ nhu cầu học tập, nghiên cứu và làm việc hiệu quả

Chủ đề:

Bình luận(0) Đăng nhập để gửi bình luận!

Lưu

Nội dung Text: Thức ăn chăn nuôi - Xác định hàm lượng chlotetracycline, oxytetracycline và tetracycline bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao

BỘ NÔNG NGHIỆP VÀ PHÁT TRIỂN NÔNG THÔN 10TCN TIÊU CHUẨN NGÀNH 10TCN 833:2006 THỨC ĂN CHĂN NUÔI - XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG CHLOTETRACYCLINE, OXYTETRACYLINE VÀ TETRACYCLINE BẰNG PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO Animal feeding stuffs - Determination of content of chlotetracycline, oxytetracycline and tetracycline by high - performance liquid chromatographic method HÀ NỘI - 2006
TIÊU CHUẨN NGÀNH 10 TCN 833 : 2006 THỨC ĂN CHĂN NUÔI - XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG CHLOTETRACYCLINE, OXYTETRACYLINE VÀ TETRACYCLINE BẰNG PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO Animal feeding stuffs - Determination of content of chlotetracycline, oxytetracycline and tetracycline by high - performance liquid chromatographic method (Ban hành kèm theo Quyết định số QĐ/BNN-KHCN ngày tháng 12 năm 2006 của Bộ trưởng Bộ Nông nghiệp và Phát triển nông thôn) 1. Phạm vi áp dụng Tiêu chuẩn này quy định phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) để xác định hàm lượng các kháng sinh chlotetracycline (CTC), oxytetracycline (OTC) và tetracycline (TC) trong thức ăn chăn nuôi. Giới hạn phát hiện của phương pháp là 0,1 mg/kg. 2. Tài liệu viện dẫn Các tài liệu viện dẫn sau đây rất cần thiết cho việc áp dụng tiêu chuẩn. Đối với các tài liệu viện dẫn ghi năm ban hành thì áp dụng phiên bản được nêu. Đối với các tài liệu viện dẫn không ghi năm ban hành thì áp dụng phiên bản mới nhất, bao gồm cả các sửa đổi: TCVN 4851 (ISO 3696). Nước dùng để phân tích trong phòng thí nghiệm. Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử. ISO 6497:2002 (E): Animal feeding stuffs - Sampling. 3. Nguyên tắc Các kháng sinh nhóm tetracycline trong mẫu thức ăn chăn nuôi được chiết bằng dung dịch đệm ở pH 4. Dịch chiết được làm sạch bằng cột chiết pha rắn RP - C18. Các tetracycline được tách và định lượng trên hệ thống sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) với detector UV ở bước sóng 350 nm. 4. Thiết bị, dụng cụ 4.1. Máy nghiền mẫu phòng thí nghiệm. 4.2. Sàng phòng thí nghiệm, có kích thước lỗ sàng 1,00 mm và 3,00 mm. 4.3. Cân phân tích có độ chính xác 0,0001 g. 4.4. Cân kỹ thuật có độ chính xác 0,01 g. 2
4.5. Máy ly tâm có tốc độ 3000 vòng/phút, sử dụng ống ly tâm dung tích 50 ml. 4.6. ống ly tâm, dung tích 50 ml bằng polypropylen hoặc bằng thuỷ tinh, có nắp đậy. 4.7. Máy nghiền đồng thể (Homorgenizer). 4.8. Máy lắc tròn hoặc máy lắc ngang có thể đạt tốc độ 250 vòng/phút. 4.9. Máy đo pH có độ chính xác đến 0,05 đơn vị. 4.10. Phễu lọc Buchner đường kính 5,5 cm. 4.11. Giấy lọc tốc độ nhanh. 4.12. Bình định mức dung tích 10, 100, 500, 1000 ml. 4.13. Pipet tự động điều chỉnh được từ 2 ml đến 10 ml. 4.14. Micropipet dung tích từ 10 àl đến 100 àl. 4.15. Hút dung môi tự động 2 ml, 10 ml, 20 ml. 4.16. Bể siêu âm. 4.17. Bơm hút chân không. 4.18 Màng lọc syranh có kích thước 0,45 àm. 4.19. Lọ nhỏ đựng dịch mẫu chuyên dụng cho HPLC, có nắp vặn PTFE . 4.20. Thiết bị trộn mẫu phòng thí nghiệm loại Hobart Model C 100 T hoặc tương đương. 4.21. Thiết bị chia mẫu: Thiết bị chia đôi hoặc chia tư mẫu: ví dụ như thiết bị chia tư hình nón, thiết bị chia nhiều ngăn có hệ thống phân hạt hoặc các thiết bị chia khác đảm bảo phân chia mẫu thí nghiệm thành mẫu thử đồng nhất. 4.22. Hộp đựng mẫu có nắp kín. 4.23. Hệ thống HPLC gồm có: 4.23.1. Máy sắc kí lỏng hiệu năng cao, bình chứa dung môi, hệ thống bơm mẫu, Detector UV đặt được ở bước sóng 350nm, máy ghi hoặc bộ tích phân. 4.23.2. Cột phân tích HPLC pha đảo có kèm cột bảo vệ - Chiều dài 250mm - Đường kính trong 4,6mm - Hạt nhồi C 18, 5àm hoặc tương đương Chú ý : có thể sử dụng cột ngắn hơn, ví dụ có chiều dài 120mm-150mm. 5. Hoá chất và thuốc thử 3
5.1 Hoá chất Chỉ sử dụng hoá chất được công nhận đạt chất lượng tinh khiết phân tích và nước cất cấp hạng 1 theo TCVN 4851 (ISO 3696). Các dung môi phải đạt chất lượng để dùng cho phân tích HPLC. 5.1.1. Natri hydrophotphat khan (Na2HPO4). 5.1.2. axit xitric ngậm 1 phân tử nước (C6H8O7.H2O). 5.1.3. axit oxalic ngậm 2 phân tử nước (H2C2O4.2 H2O). 5.1.4. Dinatri etylen diamin tetraaxetat ngậm 2 phân tử nước (Na2EDTA. 2H2O). 5.1.5. Metanol. 5.1.6. axetonnitrile. 5.1.7. Natri hydroxit. 5.1.8. axit clohydric. 5.1.9. Chất chuẩn kháng sinh nhóm tetracycline bao gồm: chlotetracycline hydrocloride (CTC), oxytetracyclin hydrochlorid (OTC) và tetraclohydrochlorid (TC) loại tinh khiết có kèm theo giấy chứng nhận về hàm lượng. 5.2. Thuốc thử 5.2.1. Dung dịch đệm McILvaine (pH 4 ± 0,05): Dung dịch A: Cân 14,2 gam natri hyđrophotphat khan cho vào bình định mức dung tích 500 ml, hoà tan và định mức đến vạch bằng nước cất, lắc đều Dung dịch B: Cân 10,5 gam axit xitric ngậm 1 phân tử nước cho vào bình định mức dung tích 500 ml, hoà tan và định mức đến vạch bằng nước cất, lắc đều Dung dịch đệm McILvaine (pH 4 ± 0,05): Lấy 312,5 ml dung dịch A và 500 ml dung dịch B cho vào bình định mức 1000 ml, lắc đều. Sử dụng máy đo pH điều chỉnh pH của dung dịch trong bình đến pH 4 ± 0,05 bằng dung dịch HCl 0,1M hoặc dung dịch NaOH 0,1M. Dung dịch sử dụng trong một tuần. 5.2.2. Dung dịch đệm McILvaine - EDTA: Hoà tan 30,25 gam dinatri etylen diamin tetra axetat ngậm 2 phân tử nước vào 812,5 ml dung dịch đệm McILvaine (5.2.1), lắc đến tan hết và trộn đều. Dung dịch sử dụng trong một tuần. 5.2.3. Dung dịch axit oxalic trong metanol: Cân 1,26 gam axit oxalic ngậm 2 phân tử nước cho vào bình định mức dung tích 1000 ml, hoà tan và định mức đến vạch bằng methanol, lắc đều. Dung dịch này sử dụng trong ngày. 5.2.4. Pha động cho HPLC: Cân 1,26 gam Axit oxalic ngậm 2 phân tử nước vào bình định mức 1000 ml, hoà tan và định mức tới vạch bằng nước cất, lắc đều. Trộn 600 ml dung dịch axit oxalic này với 300 ml axetonnitril và 100 ml metanol, lọc hỗn hợp dung dịch thu được qua màng lọc 0,45 àm (lọc chân 4
không), siêu âm đuổi khí ở nhiệt độ phòng trong 30 phút. Dung dịch này sử dụng trong ngày. 5.2.5. Dung dịch kháng sinh chuẩn: CHÚ Ý: Việc pha các dung dịch chuẩn phải được tiến hành ở điều kiện tránh ánh sáng trực tiếp và bảo quản trong lọ sẫm màu. 5.2.5.1. Dung dịch chuẩn gốc 1000 µg/ml: Cân 108 mg (chính xác đến 0,1mg) mỗi loại chuẩn gồm CTC, OTC, TC cho vào 3 bình định mức riêng biệt dung tích 100 ml (lượng cân được điều chỉnh theo hàm lượng kháng sinh ghi trong giấy chứng nhận). Hoà tan và định mức đến vạch bằng metanol, lắc đều. Các dung dịch chuẩn gốc được bảo quản ở - 200C, có thể sử dụng những dung dịch này trong vòng 3 tháng. 5.2.5.2. Dung dịch chuẩn gốc hỗn hợp 100 µg/ml: Hút chính xác 10 ml mỗi dung dịch chuẩn gốc 1000 µg/ml (5.2.5.1) vào bình định mức 100 ml, định mức đến vạch bằng metanol, lắc đều. 5.2.5.3. Dung dịch chuẩn làm việc 25 µg/ml: Hút chính xác 2,5 ml dung dịch chuẩn hỗn hợp 100 µg/ml (5.2.5.2) vào bình định mức 100 ml, định mức đến vạch bằng metanol, lắc đều. Bảo quản dung dịch trong tủ lạnh, dung dịch bền trong 1 tuần. 5.2.5.4. Dãy dung dịch chuẩn phân tích sắc ký 0,25; 0,50; 1,25; 2,50 và 5,00 µg/ml: Hót chÝnh x¸c 100, 200, 500, 1000, 2000 µl dung dÞch chuÈn lµm viÖc 25 µg/ml (5.2.5.3) cña hçn hîp c¸c tetracyclin cho vµo b×nh ®Þnh møc dung tÝch 10 ml. Thªm 6 ml dung dÞch axit oxalic trong metanol (5.2.3) vµ ®Þnh møc ®Õn v¹ch b»ng níc cÊt, l¾c ®Òu. B¶o qu¶n dung dÞch trong tñ l¹nh, dung dÞch nµy bÒn trong 1 tuÇn. 5.2.6 Dung dÞch HCl 0,1 M 5.2.7. Dung dÞch NaOH 0,1 M 6. LÊy mÉu vµ chuÈn bÞ mÉu 6.1. LÊy mÉu Ph¬ng ph¸p lÊy mÉu kh«ng quy ®Þnh trong tiªu chuÈn nµy, nªn lÊy mÉu theo ISO 6497:2002. §iÒu quan träng lµ mÉu göi ®Õn phßng thÝ nghiÖm ph¶i lµ mÉu trung thùc vµ cã tÝnh ®¹i diÖn, kh«ng bÞ h h¹i hoÆc bÞ biÕn 5
® æ i thµnh phÇn trong qu¸ tr× nh vËn chuyÓ n vµ b¶o qu¶n. Khèi lî m Éu ph© n tÝch ph¶i kh«ng ®î Ýt h¬ n ng c 500 gam . 6.2. ChuÈn bÞ mÉu 6.2.1. MÉu ë d¹ng bét mÞn NÕu mÉu thÝ nghiÖm ë d¹ng bét lät hoµn toµn qua sµng cã kÝch thíc lç sµng 1,00 mm th× trén thËt ®Òu mÉu (500 gam) b»ng m¸y trén phßng thÝ nghiÖm lo¹i Hobart (hoÆc t¬ng ®¬ng) trong vßng 10 phót. Sau ®ã chia hçn hîp b»ng thiÕt bÞ chia ®«i hoÆc thiÕt bÞ chia t cho ®Õn khi thu ®îc lîng mÉu thö kh«ng díi 100 gam. Cho toµn bé mÉu thö vµo hép ®ùng mÉu vµ ®Ëy n¾p cÈn thËn. 6.2.2. MÉu cã kÝch thíc h¹t võa 6.2.2.1. NÕu mÉu thÝ nghiÖm kh«ng lät hÕt qua sµng cã kÝch thíc lç sµng 1,00 mm nhng lät hoµn toµn qua sµng cã kÝch thíc lç 3,00 mm th× trén thËt ®Òu mÉu (kh«ng Ýt h¬n 500 gam) b»ng m¸y trén phßng thÝ nghiÖm lo¹i Hobart (hoÆc t¬ng ®¬ng) trong vßng 10 phót. 6.2.2.2. Dïng thiÕt bÞ chia ®«i hoÆc thiÕt bÞ chia t mÉu ®∙ trén ®Òu (6.2.2.1) cho ®Õn khi thu ®îc lîng mÉu thö kh«ng díi 100 gam. NghiÒn lîng mÉu nµy cÈn thËn trong m¸y nghiÒn (4.1) cho dÕn khi mÉu lät hoµn toµn qua sµng cã kÝch thíc lç sµng 1,00 mm. 6.2.3. MÉu cã kÝch thíc h¹t to 6.2.3.1. NÕu mÉu kh«ng lät qua sµng cã kÝch thíc lç sµng 3,00 mm th× cÇn nghiÒn mÉu (kh«ng Ýt h¬n 500 gam) trªn m¸y nghiÒn (4.1) cho ®Õn khi mÉu lät hoµn toµn qua sµng cã kÝch thíc lç sµng 3,00 mm, sau ®ã trén thËt ®Òu mÉu b»ng m¸y trén phßng thÝ nghiÖm lo¹i Hobart (hoÆc t¬ng ®¬ng) trong vßng 10 phót. 6.2.3.2. Dïng thiÕt bÞ chia ®«i hoÆc thiÕt bÞ chia t mÉu ®∙ trén ®Òu (6.2.3.1) cho ®Õn khi thu ®îc lîng mÉu thö kh«ng díi 100 gam. NghiÒn lîng mÉu nµy cÈn thËn trong m¸y nghiÒn (4.1) cho ®Õn khi mÉu lät hoµn toµn qua sµng cã kÝch thíc lç sµng 1,00 mm. MÉu thö ®îc b¶o qu¶n trong c¸c lä ®ùng mÉu (4.22) ë ®iÒu kiÖn nhiÖt ®é 2 – 250C, n¬i kh« r¸o. Chó ý: Nªn nghiÒn, trén mÉu trong c¸c phßng cã th«ng giã, nªn ®eo kÝnh, khÈu trang vµ g¨ng tay b¶o vÖ. 6
7. C¸ch tiÕn hµnh 7.1. ChiÕt mÉu 7. . . C© n 1 1 chÝnh x¸c ® Õn 01g tõ 1 – 5 gam m Éu ® ∙ 0, ® î nghi n m Þn theo m ôc 6 (tuú theo hµm lî kh¸ng c Ò ng si cã trong m Éu) nh cho vµo èng l t m dung tÝch 50 m l y © (èng l t m 1), thªm ti p 20 m l dung dÞch ® Öm y © Õ M cILva i – ED TA (5 . .2 ), l ® ång nhÊt m Éu trong 1 ne 2 µm phót b»ng m ¸y nghi n ® ång thÓ . Tr¸ng röa ® Çu m ¸y Ò nghi n ® ång thÓ 2 l n , m çi l n b»ng 2 m l dung dÞch Ò Ç Ç ® Öm M cILva i – ED TA . §Ëy n¾ p èng l t m vµ l c èng ne y © ¾ trong 10 phót ë tèc ® é cao. ChuyÓ n èng vµo m ¸y l y t m , y t m trong 10 phót ë tèc ® é © l © 3000 vßng/ phót. 7. . . G ¹ 1 2 n phÇn dÞch trong phÝa trªn èng l t m 1 vµo y © m ét èng l t m kh¸c (èng l t m 2). Thª ti p 20 m l y © y © m Õ dung dÞch ® Öm M cILva i – ED TA (5 . .2 ) vµo èng l t m ne 2 y © 1, ® Ëy n¾ p, ¾ c trong 10 phót vµ l t m trong 10 phót l y © ë tèc ® é 3000 vßng/phót. Ti p tôc g¹n phÇn dÞch trong Õ phÝa trªn èng l t m 1 vµo èng l t m 2. Sau ® ã ¹i y © y © l thªm 10 m l dung dÞch ® Öm M cILva i – ED TA (5 . .2 ) vµo ne 2 èng l t m 1, l c vµ l t m nh trªn vµ g¹n ti p phÇn y © ¾ y © Õ dÞch trong phÝa trªn èng l t m 1 vµo èng l t m 2. y © y © 7. . . Ly t m èng l t m 2 trong 20 phót ë tèc ® é 1 3 © y © 3000 vßng/ phót. Sau ® ã l b»ng ch© n kh«ng qua gi äc Êy l trªn phÔ u Buchner vµo b× nh tam gi 125 m l äc ¸c . Tr¸ng röa èng l t m vµ phÔ u l 2 l , m çi l b»ng 2 m l y © äc Çn Çn dung dÞch ® Öm cI M Lvai – EDTA (5 . . ). ne 2 2 7 . . ChuÈn bÞ m Éu 2 tr¾ ng M Éu tr ng l m Éu thøc ¨n ch¨n nu«i ®î x¸c ® Þnh l ¾ µ c µ kh«ng cã kh¸ng si nhãm tetracyclin . M Éu tr ng ®î nh ¾ c chuÈn bÞ t¬ ng tù nh m Éu thö theo 7. . 1 7 . . ChuÈn bÞ m Éu Ó 3 ® x¸c ® Þnh é ® thu håi M Éu nµy ®î bæ sung m ét lî kh¸ng si xÊp xØ dung c ng nh dÞch chuÈn gèc. VÝ dô, chuÈn bÞ dÞch m Éu thu håi cã hµm lî kh¸ng si l 1 m g/ ng nh µ kg: dï pi ng pet hót 200 µl dung dÞch chuÈn l vi c 25 µg/ l (5 . .5 .3 ) cho vµo 5 µm Ö m 2 gam m Éu tr ng (7 . ) vµ ti p tôc qu¸ tr× nh ch i t m Éu ¾ 2 Õ Õ t¬ ng tù nh ® èi víi m Éu thö (7 . ). 1 7 . . Lµm s¹ch 4 7
7. . . Nèi cét SPE C18 víi ® Çu ra cña m ét syranh 4 1 thuû tinh dung tÝch 100 m l röa cét b»ng 20 m l , m etanol sau ® ã , b»ng 20 m l c cÊt, l ¹i bá dÞch qua ní o cét. 7. . . LÇn lît cho c¸c dÞch ch i t trong èng l t m 4 2 Õ y © thu ®î tõ 7. . , 7. vµ 7. qua syranh vµo cét SPE c 1 3 2 3 C18 ® ∙ c chuÈn bÞ ë trªn , dï b¬m hót ch© n kh«ng ®î ng vµ ® i u chØ nh tèc ® é ch¶y kh«ng qu¸ 2m l phót. Tr¸ng Ò / èng li t m b»ng 10 m l © dung dÞch ® Öm M cI Lva i ED TA ne (5 . .2 ) vµ chuyÓ n hÕ t vµo cét SPE – C18, kh«ng ®Ó cét 2 bÞ kh« trong giai ®o¹n nµy, röa cét b»ng 20 m l c cÊt ní vµ ti p tôc hót ch© n kh«ng ® Ó l kh« cét thªm 2 Õ µm phót. 7. . . Röa gi i c¸c kh¸ng si trong cét SPE C18 4 3 ¶ nh b»ng c¸ch cho 6 m l dung dÞch axi oxali trong t c m et hanol (5 . .3 ) ch¶y qua cét víi tèc ® é 5 m l phót. 2 1, / Thu dÞch qua khái cét vµo b× nh ® Þnh m øc 10 m l Sau . kh i dÞch röa gi i ch¶y hÕ t, ti p tôc hót ch© n kh«ng ¶ Õ thªm kho¶ng 10 gi y ® Ó ® ¶m b¶o thu hÕ t ®î dÞch röa © c gi i. §Þnh m øc dÞch thu ®î ® Õn v¹ch b»ng ní cÊt, ¶ c c l c ® Òu, ¾ sau ® ã äc qua m µng l 0, µm vµo l nhá l äc 45 ä chuyªn dông cho H PLC (4 . ) ® Ó ph© n tÝch trªn hÖ 19 thèng s¾ c kÝ. 7.5. TiÕn hµnh trªn HPLC 7.5.1. §iÒu kiÖn ch¹y m¸y Tèc ®é dßng 1 ml/phót NhiÖt ®é cét nhiÖt ®é phßng Detector detector UV bíc sãng 350 nm ThÓ tÝch b¬m mÉu 50 µl 7.5.2. TiÕn hµnh 7.5.2.1. Nªn sö dông b¶o vÖ cét, viÖc sö dông b¶o vÖ cét kh«ng cã bÊt cø ¶nh hëng nµo ®Õn kÕt qu¶ ph©n tÝch. 7.5.2.2. C©n b»ng hÖ thèng s¾c ký b»ng pha ®éng 30 phót tríc khi b¬m mÉu. 7.5.2.3. Quy tr×nh b¬m mÉu theo thø tù nh sau: DÞch mÉu tr¾ng 8
D ung dÞch chuÈn l vi c µm Ö D Þch m Éu thu håi D Þch m Éu thö D ung dÞch chuÈn l vi c µm Ö Chó ý: CÇn b¬m c¸c dÞch chuÈn tr í vµ sau m çi ® î c t ph© n tÝch , kh«ng nªn ® Ó qu¸ 20 l n b¬m m Éu cho m çi Ç ®ît ph© n tÝch . NÕ u qu¸ 20 l n th× ph¶i b¬m c¸c dung Ç dÞch chuÈn thªm l n n÷ a vµo kho¶ng gi a ® î Ç ÷ t b¬m m Éu. 7. . .4 . X¸c ® Þnh di n tÝch (hoÆ c ch i u cao) pi ® èi 5 2 Ö Ò c víi c¸c dung dÞch chuÈn vµ dung dÞch m Éu thö t¬ ng øng 7. . .5 . Sau kh i ch¹y m ¸y ph¶i l s¹ch hÖ thèng H PLC 5 2 µm b»ng hçn hî gåm ní cÊt : axetonn i p c tril : m ethanol theo tû l thÓ tÝch 7 : 2 : 1 trong 30 phót. Ö 8. TÝnh to¸n kÕt qu¶ 8.1. §êng chuÈn 8.1.1. Ph¶i ®¶m b¶o r»ng c¸c diÖn tÝch pic cña mÉu thö ®Òu n»m trong ph¹m vi cña ®êng chuÈn. NÕu mÉu thö nµo cã diÖn tÝch pic vît qu¸ diÖn tÝch cña ®êng chuÈn ë nång ®é cao nhÊt th× sÏ bÞ lo¹i vµ ph¶i tiÕn hµnh thö l¹i víi sù pha lo∙ng. 8.1.2. X©y dùng ®êng chuÈn biÓu thÞ mèi quan hÖ gi÷a diÖn tÝch pic thu ®îc cña dung dÞch chuÈn víi nång ®é cña tõng lo¹i theo quan hÖ tuyÕn tÝnh bËc 1: y = ax + b Trong ®ã: y lµ diÖn tÝch pic (hoÆc chiÒu cao cña pic). x lµ nång ®é cña kh¸ng sinh. a lµ hÖ sè gãc. b lµ h»ng sè. 8.2. TÝnh to¸n 8.2.1. Hµm lîng c¸c kh¸ng sinh cã trong mÉu thö ®îc tÝnh to¸n dùa vµo ®êng chuÈn håi qui tuyÕn tÝnh (8.1.2) theo c«ng thøc sau: (Y − b) V X= × a m 9
Trong ® ã: X l hµm lî kh¸ng si cã trong m Éu µ ng nh thö, tÝnh b»ng m g/ kg. Y l hi u sè gi a di n tÝch pi cña dÞch µ Ö ÷ Ö c ch i t m Éu Õ thö vµ di n tÝch Ö pi cña m Éu ¾ ng. c tr a, b l c¸c th«ng sè cña ®êng chuÈn y = ax + µ b V l thÓ tÝch dÞch chi t thu ®î sau khi l µ Õ c µm s¹ch (7 . . ), tÝnh b»ng m l 4 3 m l khèi lî m Éu µ ng thö, tÝnh b»ng gam . 8. . . KÕ t qu¶ cuèi cï l gi trung b× nh cña hai 2 2 ng µ ¸ l n ph© n tÝch nh¾ c l Ç ¹i. Trong qu¸ tr× nh tÝnh to¸n lu«n ph¶i l hai sè sau dÊu phÈy. G i Êy ¸ trÞ trung b× nh ®î l trßn ® Õn ét c µm m ch÷ sè thËp ph© n. 8. . . X¸c ® Þnh ® é 2 3 thu håi (R ) theo c«ng thøc sau: C1 R (%) = ×100 C Trong ® ã: C1 lµ hµm lîng tetracyline x¸c ®Þnh ®îc theo quy tr×nh ph©n tÝch (tÝnh b»ng mg/kg). C lµ hµm lîng tetracyline ®îc n¹p thªm vµo mÉu (1,25 mg/kg). §é thu håi ®îc x¸c ®Þnh cho mçi lÇn ch¹y mÉu Ýt nhÊt ph¶i ®¹t 80%. 9. B¸o c¸o thö nghiÖm B¸o c¸o kÕt qu¶ ph¶i bao gåm Ýt nhÊt c¸c th«ng tin díi ®©y: Mäi th«ng tin cÇn thiÕt ®Ó nhËn biÕt mÉu thö. ViÖn dÉn cña tiªu chuÈn nµy hoÆc ph¬ng ph¸p thö. KÕt qu¶ vµ ®¬n vÞ biÓu thÞ kÕt qu¶. Ngµy th¸ng lÊy mÉu vµ kiÓu lo¹i lÊy mÉu (nÕu cã). Ngµy th¸ng thö nghiÖm. C¸c ®iÓm ®Æc biÖt quan s¸t ®îc trong qu¸ tr×nh thö nghiÖm. 10
M äi thao t¸c kh«ng qui ® Þnh trong tiªu chuÈn nµy, hoÆ c ®î coi l tuú chän, cï víi c¸c ch i ti t cña c µ ng Õ sù cè bÊt kú m µ cã thÓ ¶nh hëng ® Õn kÕ t qu¶. Bùi Bá Bổng 11