Xây dựng quy trình chiết xuất piperin bằng dung môi ethanol từ hạt hồ tiêu

TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 3-2014<br /> XÂY DỰNG QUY TRÌNH CHIẾT XUẤT PIPERIN BẰNG<br /> DUNG MÔI ETHANOL TỪ HẠT HỒ TIÊU (PIPER NIGRI L.)<br /> Phạm Thị Mai Hiên*; Nguyễn Minh Chính*; Đỗ Văn Bình*<br /> Đào Văn Đôn*; Nguyễn Thị Thanh Hương<br /> TÓM TẮT<br /> Quy trình chiết xuất piperin trong hồ tiêu bằng dung môi ethanol đã đƣợc khảo sát và xây dựng.<br /> Điều kiện chiết xuất tối ƣu bằng dung môi ethanol: phƣơng pháp chiết siêu âm, kÝch th-íc tiểu phân<br /> 0<br /> 0<br /> 0,35 mm, cồn ethylic 96 , tỷ lệ cồn ethylic - dƣợc liệu (3:1), nhiệt độ 40 , chiết 3 lần, mỗi lần chiết<br /> 1 giờ. Hiệu suất chiết piperin của quy trình là 96,6%.<br /> * Từ khóa: Hồ tiêu; Piperin; Chiết xuất.<br /> <br /> PROCESS OF EXTRACTION OF PIPERINE BY ETHANOL<br /> FROM PIPER NIGRI L.<br /> Summary<br /> Ultrasound method for extraction of piperine from pepper was established. Conditions of<br /> ultrasound extraction: particle size at 0.35 mm, using ethanol 96% as the extraction solvent<br /> 0<br /> with ratio of 1:3 (herbal/solvent); 03 times of extraction, 60 min per time, temperature at 40 C,<br /> 0<br /> remove solvent at 40 C her high temperature under low pressure. Efficiency of piperine extraction<br /> reached 96.6%.<br /> * Key words: Piper nigri L.; Piperine; Extraction.<br /> <br /> ĐẶT VẤN ĐỀ<br /> Hồ tiêu (Piper nigri L.) đƣợc trồng rộng<br /> rãi trong những năm gần đây, sản phẩm<br /> hồ tiêu không những đáp ứng nhu cầu thị<br /> trƣờng trong nƣớc mà còn đƣợc xuất<br /> khẩu đi nhiều nƣớc trên thế giới [1, 4]. Từ<br /> 2002, Việt Nam đã vƣơn lên trở thành<br /> nƣớc dẫn đầu, và đến nay vẫn chiếm một<br /> nửa khối lƣợng hồ tiêu xuất khẩu trên<br /> toàn thế giới [4]. Hồ tiêu hạt đƣợc sử<br /> dụng làm gia vị trong ngành thực phẩm.<br /> Hoạt chất piperin chiết xuất từ hạt hồ tiêu<br /> <br /> đƣợc sử dụng phổ biến trong ngành<br /> dƣợc phẩm với nhiều hoạt tính sinh học<br /> tốt [1, 5]. Đã có một số công trình nghiên<br /> cứu công bố về quy trình chiết xuất<br /> piperin từ hồ tiêu [3]. Tuy nhiên, các quy<br /> trình này sử dụng dung môi không an<br /> toàn, gây độc đối với cơ thể. Do đó, cần<br /> có nghiên cứu về chiết xuất hoạt chất này<br /> bằng dung môi an toàn, rẻ tiền để đạt<br /> hiệu quả cao và dung môi ethanol đƣợc<br /> lựa chọn cho nghiên cứu này.<br /> <br /> * Học viện Quân y<br /> Người phản hồi (Corresponding): §µo V¨n §«n (daovandon@gmail.com)<br /> Ngày nhận bài: 14/10/2014; Ngày phản biện đánh giá bài báo: 19/01/2014<br /> Ngày bài báo được đăng: 11/02/2014<br /> <br /> 7<br /> <br /> TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 3-2014<br /> NGUYÊN LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP<br /> NGHIÊN CỨU<br /> 1. Nguyên vật liệu.<br /> * Nguyên liệu:<br /> Hạt tiêu đen (Piper nigri L.) đƣợc thu mua<br /> tại Hà Đông và lƣu mẫu tại Khoa Dƣợc liệu,<br /> Trung tâm Đào tạo - Nghiên cứu Dƣợc,<br /> Học viện Quân y.<br /> * Hoá chất:<br /> - Hoá chất: chuẩn piperin (98,1%) của<br /> Sigma-aldrich. MeOH, ACN đạt tiêu chuẩn<br /> HPLC. EtOH đạt tiêu chuẩn tinh khiết phân<br /> tích.<br /> * Dụng cụ - thiết bị:<br /> - Hệ thống HPLC WATERS 2695D,<br /> detector PDA, 4 kênh dung môi.<br /> - Máy cất quay chân không Tokyo<br /> Rikakikai model N-100 (Nhật).<br /> - Thiết bị siêu âm gia nhiệt memmert<br /> GmbH+ Co. KG D- 91126 Schwabach FRG<br /> (Đức).<br /> - Bình chiết và các dụng cụ thủy tinh<br /> khác.<br /> Tiến hành thí nghiệm tại Trung tâm Đào<br /> tạo - Nghiên cứu Dƣợc, Học viện Quân y.<br /> 2. Phƣơng pháp nghiên cứu.<br /> * Xây dựng quy trình chiết xuất:<br /> - Khảo sát lựa chọn phƣơng pháp chiết<br /> xuất: chiết Shoxlet, chiết ngấm kiệt và chiết<br /> siêu âm gia nhiệt.<br /> + Chiết siêu âm: chiết 50 g bột hồ tiêu<br /> với 150 ml ethanol 960 ở nhiệt độ 400C.<br /> Sau 1 giờ, gạn lấy dịch chiết. Chiết tiếp<br /> tục bã dƣợc liệu với ethanol 2 lần nữa<br /> (150 ml x 2 lần).<br /> <br /> 8<br /> <br /> + Chiết Shoxlet: chiết 50 g bột hồ tiêu<br /> với 200 ml ethanol 960. Sau 6 giờ, gạn lấy<br /> dịch chiết.<br /> + Chiết ngấm kiệt: cho 50 g bột hồ tiêu<br /> vào bình ngầm kiệt, thêm ethanol 960 cho<br /> đến ngập dƣợc liệu 2 - 3 cm. Sau 24 giờ,<br /> rút từ từ dịch chiết, đồng thời bổ sung<br /> dung môi vào bình ngấm kiệt. Tiến hành<br /> chiết tới khi thu đƣợc 300 ml dịch chiết.<br /> - Khảo sát các yếu tố: kích thƣớc tiểu<br /> phân, nồng độ ethanol, tỷ lệ dung môi/<br /> dƣợc liệu; số lần chiết xuất; nhiệt độ và<br /> thời gian chiết xuất.<br /> - Dịch chiết ethanol đƣợc cô chân không<br /> ở nhiệt độ 400C tới cắn.<br /> - Chỉ tiêu đánh giá: lƣợng piperin chiết<br /> đƣợc (hàm lƣợng piperin trong cắn ethanol<br /> x khối lƣợng cắn)/lƣợng piperin có trong<br /> mẫu nguyên liệu.<br /> * Định lượng piperin bằng HPLC:<br /> - Theo dƣợc điển Trung Quốc (2010) [2].<br /> - Xử lý mẫu hồ tiêu: cân chính xác<br /> 0,25 g bột hồ tiêu (bột khô mịn) cho vào<br /> bình cầu 100 ml, thêm 80 ml EtOH, chiết<br /> siêu âm 30 phút, thêm EtOH vừa đủ tới<br /> vạch, trộn đều. Lọc qua màng lọc 0,45<br /> µm trƣớc khi phân tích HPLC.<br /> - Xử lý mẫu sản phẩm chiết xuất piperin:<br /> cân chính xác 50 mg mẫu cho vào bình<br /> định mức 50 ml, thêm MeOH vừa đủ tới<br /> vạch, trộn đều. Lấy chính xác 2 ml dung<br /> dịch này, pha loãng với MeOH thành<br /> 25 ml. Lọc qua màng lọc 0,45 µm trƣớc<br /> khi phân tích HPLC.<br /> - Điều kiện HPLC: cột sắc ký: Gemini<br /> C18 (4,6 x 250 mm; 5 µm); detector UV:<br /> 343 nm; pha động: MeOH-nƣớc (77:23,<br /> v/v); tốc độ dòng: 1 ml/phút; thể tích bơm<br /> mẫu: 10 µl.<br /> <br /> TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 3-2014<br /> KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ<br /> BÀN LUẬN<br /> <br /> Đánh giá hàm lƣợng piperin trong mẫu<br /> nghiên cứu (hồ tiêu) bằng HPLC theo<br /> phƣơng pháp của dƣợc điển Trung Quốc.<br /> Tiến hành phân tích 5 mẫu. Kết quả cho<br /> thấy: hàm lƣợng piperin trong mẫu nghiên<br /> cứu là 3,41 ± 0,05% (n = 5). Đây là cơ sở<br /> để tính hiệu suất chiết của quy trình.<br /> <br /> suất chiết của 2 phƣơng pháp không<br /> khác biệt (p > 0,1). Phƣơng pháp chiết<br /> Shoxlet cần tạp chất ít hơn so với chiết<br /> siêu âm. Tuy nhiên, phƣơng pháp chiết<br /> Shoxlet cần thời gian dài, chỉ có thể triển<br /> khai ở quy mô phòng thí nghiệm, khó có<br /> khả năng triển khai ở quy mô công nghiệp.<br /> Trong khi phƣơng pháp chiết siêu âm có<br /> thời gian chiết ngắn, dễ dàng triển khai ở<br /> quy mô công nghiệp. Do vậy, phƣơng pháp<br /> này đƣợc lựa chọn để tiếp tục nghiên cứu.<br /> <br /> 2. Kết quả lựa chọn phƣơng pháp<br /> chiết.<br /> <br /> 3. Kết quả khảo sát các yếu tố ảnh<br /> hƣởng tới hiệu suất chiết.<br /> <br /> 1. Kết quả định lƣợng piperin trong<br /> nguyên liệu hồ tiêu.<br /> <br /> Tiến hành khảo sát các phƣơng pháp<br /> chiết xuất: chiết siêu âm, chiết Shoxlet,<br /> chiết ngấm kiệt nhƣ đã mô tả ở phần<br /> phƣơng pháp. Lƣợng mẫu chiết 50 g bột<br /> hồ tiêu khô.<br /> Bảng 1: Kết quả chiết xuất piperin theo<br /> các phƣơng pháp chiết khác nhau (n = 5).<br /> SẢN<br /> PHẨM<br /> THÔ (g)<br /> <br /> HÀM<br /> LƢỢNG<br /> PIPERIN<br /> (%)<br /> <br /> HIỆU<br /> SUẤT<br /> (%)<br /> <br /> Siêu âm (1)<br /> <br /> 3,28 ±<br /> 0,25<br /> <br /> 50,5 ±<br /> 3,8<br /> <br /> 96,6<br /> ± 1,4<br /> <br /> Shoxlet (2)<br /> <br /> 3,09 ±<br /> 0,18<br /> <br /> 53,6 ±<br /> 3,6<br /> <br /> 96,8<br /> ± 1,4<br /> <br /> Ngấm kiệt (3)<br /> <br /> 2,81 ±<br /> 0,30<br /> <br /> 48,9 ±<br /> 4,9<br /> <br /> 79,8<br /> ± 1,0<br /> <br /> PHƢƠNG<br /> PHÁP CHIẾT<br /> <br /> THỐNG<br /> KÊ<br /> <br /> p1-2 > 0,1<br /> p1-3 < 0,05<br /> <br /> Phƣơng pháp ngấm kiệt cho hiệu suất<br /> chiết 79,8%, thấp hơn nhiều so với phƣơng<br /> pháp chiết siêu âm và chiết Shoxlet<br /> (p < 0,05). Trong khi đó, tạp chất tƣơng<br /> tự nhƣ phƣơng pháp chiết siêu âm.<br /> Do đó, phƣơng pháp này không đƣợc lựa<br /> chọn cho nghiên cứu tiếp theo.<br /> Phƣơng pháp chiết siêu âm và phƣơng<br /> pháp chiết Shoxlet có hiệu suất chiết rất<br /> cao (> 96%), gần nhƣ chiết đƣợc hết hoạt<br /> chất piperin ra khỏi mẫu hồ tiêu. Hiệu<br /> <br /> - Kích thước tiểu phân:<br /> Nghiền hồ tiêu khô thành bột ở kích cỡ<br /> khác nhau và chiết siêu âm theo quy trình<br /> đã khảo sát ở trên. Xác định khối lƣợng<br /> cắn và hàm lƣợng piperin trong sản phẩm<br /> thô chiết đƣợc.<br /> Bảng 2: Ảnh hƣởng của kích thƣớc<br /> tiểu phân tới hiệu suất chiết (n = 5).<br /> KÍCH<br /> THƢỚC<br /> TIỂU<br /> PHÂN<br /> <br /> SẢN<br /> PHẨM<br /> THÔ (g)<br /> <br /> HÀM<br /> LƢỢNG<br /> PIPERIN<br /> (%)<br /> <br /> HIỆU<br /> SUẤT<br /> (%)<br /> <br /> 0,8 mm<br /> (1)<br /> <br /> 2,58 ±<br /> 0,14<br /> <br /> 53,4 ±<br /> 2,5<br /> <br /> 80,6 ±<br /> 1,2<br /> <br /> 0,35 mm<br /> (2)<br /> <br /> 3,28 ±<br /> 0,25<br /> <br /> 50,5 ±<br /> 3,8<br /> <br /> 96,6 ±<br /> 1,4<br /> <br /> 0,18 mm<br /> (3)<br /> <br /> 3,88 ±<br /> 0,09<br /> <br /> 42,8 ±<br /> 1,5<br /> <br /> 97,3 ±<br /> 1,6<br /> <br /> THỐNG<br /> KÊ<br /> <br /> p1-2 < 0,05<br /> p2-3 > 0,1<br /> <br /> Khi sử dụng phƣơng pháp chiết siêu<br /> âm để chiết xuất piperin từ hồ tiêu, nếu<br /> kích thƣớc tiểu phân 0,8 mm, chỉ chiết<br /> đƣợc 80,6% piperin có trong hồ tiêu,<br /> không chiết hết đƣợc hoạt chất. Khi giảm<br /> kích thƣớc xuống 0,35 mm, có thể chiết<br /> xuất đƣợc gần nhƣ hoàn toàn piperin có<br /> trong mẫu với hiệu suất chiết 96,6%. Khi<br /> giảm kích thƣớc tiểu phân xuống 0,18<br /> mm, hiệu suất chiết không tăng lên so với<br /> 9<br /> <br /> TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 3-2014<br /> kích thƣớc tiểu phân 0,35 mm (p > 0,1).<br /> Mặt khác, tạp chất lại nhiều hơn. Do đó,<br /> kích thƣớc tiểu phân 0,35 là thích hợp để<br /> chiết xuất piperin trong hồ tiêu.<br /> <br /> SẢN<br /> PHẨM<br /> THÔ (g)<br /> <br /> 300C (1)<br /> <br /> 2,71 ±<br /> 0,15<br /> <br /> 53,6 ±<br /> 2,3<br /> <br /> 85,1 ± 1,7<br /> <br /> 400C (2)<br /> <br /> 3,28 ±<br /> 0,25<br /> <br /> 50,5 ±<br /> 3,8<br /> <br /> 96,6 ± 1,4 p2-1 < 0,05<br /> <br /> 500C (3)<br /> <br /> 3,40 ±<br /> 0,17<br /> <br /> 47,4 ±<br /> 3,6<br /> <br /> 600C (4)<br /> <br /> 3,50 ±<br /> 0,17<br /> <br /> 44,3 ±<br /> 1,7<br /> <br /> - Tỷ lệ dược liệu/dung môi:<br /> Cân 50 g dƣợc liệu đƣợc chiết xuất<br /> siêu âm bằng dung môi EtOH với tỷ lệ<br /> khác nhau. Chiết 3 lần, gộp dịch chiết,<br /> bốc hơi tạo cắn và định lƣợng piperin.<br /> Bảng 3: Ảnh hƣởng của tỷ lệ dƣợc liệu<br /> - dung môi tới hiệu suất chiết (n = 5).<br /> HÀM<br /> TỶ LỆ DƢỢC<br /> SẢN<br /> LƢỢNG<br /> LIỆU/DUNG PHẨM<br /> PIPERIN<br /> MÔI<br /> THÔ (g)<br /> (%)<br /> <br /> HIỆU<br /> SUẤT<br /> (%)<br /> <br /> THỐNG<br /> KÊ<br /> <br /> 1:2 (1)<br /> <br /> 3,07 ±<br /> 0,26<br /> <br /> 50,9 ±<br /> 3,8<br /> <br /> 91,3 ±<br /> 1,9<br /> <br /> 1:3 (2)<br /> <br /> 3,28 ±<br /> 0,25<br /> <br /> 50,5 ±<br /> 3,8<br /> <br /> 96,6 ± p2-1 < 0,05<br /> 1,4<br /> p2-3 > 0,1<br /> <br /> 1:4 (2)<br /> <br /> 3,32 ±<br /> 0,23<br /> <br /> 50,3 ±<br /> 3,2<br /> <br /> 97,6 ±<br /> 1,1<br /> <br /> Tỷ lệ dƣợc liệu/dung môi (1:2) cho hiệu<br /> suất chiết thấp nhất (91,3%). Khi tỷ lệ dung<br /> môi tăng, hiệu suất chiết cũng tăng lên. Ở<br /> tỷ lệ dƣợc liệu/dung môi (1:3), hiệu suất<br /> chiết 96,6%, tƣơng tự nhƣ hiệu suất chiết<br /> ở tỷ lệ dƣợc liệu/dung môi (1:4) (p > 0,1).<br /> Độ tinh khiết của sản phẩm chiết xuất<br /> đƣợc ở cả 3 tỷ lệ dung môi/ dƣợc liệu<br /> không khác biệt (p > 0,1). Nhƣ vậy, tỷ lệ<br /> dƣợc liệu/dung môi (1:3) là thích hợp nhất<br /> cho chiết xuất piperin.<br /> - Nhiệt độ chiết xuất:<br /> Khảo sát ảnh hƣởng của nhiệt độ tới<br /> hiệu suất chiết ở nhiệt độ khác nhau.<br /> Bảng 4: Ảnh hƣởng của nhiệt độ tới<br /> hiệu suất chiết (n = 5).<br /> <br /> 10<br /> <br /> HÀM<br /> LƢỢNG<br /> HIỆU<br /> PIPERIN SUẤT (%)<br /> (%)<br /> <br /> NHIỆT<br /> ĐỘ<br /> <br /> 94,1 ± 1,0<br /> <br /> THỐNG<br /> KÊ<br /> <br /> p2-3 < 0,05<br /> p2-4 < 0,05<br /> <br /> 91,0 ± 1,8<br /> <br /> Khi tăng nhiệt độ chiết lên 30 - 600C,<br /> hiệu suất chiết thay đổi trong khoảng từ<br /> 85,1 - > 96,6%. Ở 400C, hiệu suất chiết<br /> cao nhất (96,6%). Khi tăng tới nhiệt độ<br /> 600C, hiệu suất chiết giảm còn 91,0%;<br /> do ở nhiệt độ này, một phần piperin bị<br /> phân hủy. Do vậy, nhiệt độ chiết thích<br /> hợp là 400C.<br /> - Số lần chiết xuất:<br /> Tiến hành chiết xuất dƣợc liệu với số<br /> lần chiết khác nhau: 1 lần, 2 lần, 3 lần và<br /> 4 lần.<br /> Bảng 5: Ảnh hƣởng của số lần chiết<br /> tới hiệu suất chiết (n = 5).<br /> SỐ LẦN<br /> CHIẾT<br /> <br /> SẢN<br /> PHẨM<br /> THÔ (g)<br /> <br /> HÀM<br /> LƢỢNG<br /> PIPERIN<br /> (%)<br /> <br /> HIỆU<br /> SUẤT<br /> (%)<br /> <br /> 1 lần (1)<br /> <br /> 2,24 ±<br /> 0,12<br /> <br /> 50,7 ±<br /> 2,1<br /> <br /> 66,5 ±<br /> 1,4<br /> <br /> 2 lần (2)<br /> <br /> 3,10 ±<br /> 0,27<br /> <br /> 50,7 ±<br /> 4,3<br /> <br /> 91,6 ±<br /> 1,7<br /> <br /> p3-1 < 0,05<br /> <br /> 3 lần (3)<br /> <br /> 3,28 ±<br /> 0,25<br /> <br /> 50,5 ±<br /> 3,8<br /> <br /> 96,6 ±<br /> 1,4<br /> <br /> p3-4 > 0,1<br /> <br /> 4 lần (4)<br /> <br /> 3,30 ±<br /> 0,08<br /> <br /> 50,0 ±<br /> 0,9<br /> <br /> 96,8 ±<br /> 1,4<br /> <br /> THỐNG<br /> KÊ<br /> <br /> p3-2 < 0,05<br /> <br /> Khi tăng số lần chiết xuất piperin từ<br /> 1 lần lên 4 lần, hiệu suất chiết tăng theo<br /> tƣơng ứng 72 - 96%. Hiệu suất chiết 4 lần<br /> là 96,8% so với chiết 3 lần là 96,6%; khác<br /> biệt không có ý nghĩa thống kê (p > 0,1).<br /> <br /> TẠP CHÍ Y - DƢỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ 3-2014<br /> Do đó, chiết xuất 3 lần là phù hợp, vì tăng<br /> lần chiết cũng không tăng đƣợc hoạt chất.<br /> - Thời gian chiết:<br /> Tiến hành khảo sát thời gian mỗi lần<br /> chiết siêu âm: 0,5 giờ, 1 giờ và 1,5 giờ.<br /> Đánh giá hiệu suất chiết với thời gian<br /> khác nhau.<br /> Bảng 6: Ảnh hƣởng của thời gian chiết<br /> tới hiệu suất chiết (n = 5).<br /> THỜI<br /> GIAN<br /> CHIẾT<br /> <br /> SẢN<br /> PHẨM<br /> THÔ (g)<br /> <br /> HÀM<br /> LƢỢNG<br /> PIPERIN<br /> (%)<br /> <br /> HIỆU<br /> SUẤT<br /> (%)<br /> <br /> 0,5 giờ<br /> (1)<br /> <br /> 2,47 ±<br /> 0,21<br /> <br /> 50,0 ±<br /> 3,8<br /> <br /> 72,1 ±<br /> 1,2<br /> <br /> 1 giờ (2)<br /> <br /> 3,28 ±<br /> 0,25<br /> <br /> 50,5 ±<br /> 3,8<br /> <br /> 96,6 ±<br /> 1,4<br /> <br /> 2 giờ (3)<br /> <br /> 3,29 ±<br /> 0,22<br /> <br /> 50,9 ±<br /> 3,3<br /> <br /> 97,8 ±<br /> 0,9<br /> <br /> THỐNG<br /> KÊ<br /> <br /> p2-1 < 0,05<br /> p2-3 > 0,1<br /> <br /> Chiết siêu âm 0,5 giờ có hiệu suất<br /> chiết thấp nhất. Khi tăng thời gian lên<br /> 1 giờ, hiệu suất chiết cao hơn hẳn so với<br /> 0,5 giờ (p < 0,05). Thời gian chiết 1,5 giờ<br /> cho hiệu suất tƣơng tự 1 giờ (p > 0,1).<br /> <br /> TÀI LIỆU THAM KHẢO<br /> 1. Viện Dược liệu. Cây thuốc và động vật làm<br /> thuốc Việt Nam. NXB Khoa học và Kỹ thuật. 2006.<br /> 2. Dược điển Trung quốc. 2010.<br /> 3. Nguyễn Thị Chiên Ly. Nghiên cứu chiết<br /> tách và xác định thành phần hóa học trong<br /> hạt tiêu đen (Piper nigrum L.) ở huyện Đ¾k<br /> Đoa, tỉnh Gia Lai. Khóa luận Tốt nghiệp<br /> Đại học, Đại học Đà Nẵng. 2012.<br /> 4. Lê Thị Thùy Linh. Thực trạng xuất khẩu<br /> hồ tiêu và giải pháp tăng kim ngạch xuất khẩu<br /> hồ tiêu Việt Nam. Khóa luận Tốt nghiệp Đại học.<br /> Đại học Ngoại thƣơng. 2010.<br /> 5. Bhradwaj R.K, Glaeser H, Becquemont<br /> L, Klotz U, Gupta S.K, Fromm M.F. Piperine,<br /> a mayjor constituent of black pepper, inhibits<br /> human P-glycoprotein and CYP3A4. J Pharmacol.<br /> Exp Ther. 2002, 302 (2), pp.645-665.<br /> 6. Reimmel Kwame Adosraku, James Oppong<br /> Kyekyeku, Isaac Yaw Attah. Characterization and<br /> HPLC quantification of piperine isolated from<br /> pipper guineense (Fam. Piperaceae). International<br /> Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences.<br /> 2013, 5 (1), pp.252-256.<br /> <br /> KẾT LUẬN<br /> Đã xây dựng đƣợc quy trình chiết xuất<br /> piperin từ hồ tiêu tối ƣu bằng dung môi<br /> ethanol gồm: phƣơng pháp chiết siêu âm,<br /> tiểu phân 0,35 mm, cồn ethylic 960, tỷ lệ<br /> cồn/dƣợc liệu (3:1), nhiệt độ 400, chiết 3<br /> lần, mỗi lần chiết 1 giờ.<br /> <br /> 11<br /> <br />