Đề tài: Phân lập và tuyển chọn chủng thuần khiết, khảo sát ảnh hưởng nhiệt độ, pH và nguồn cacbon đối với chủng Pseudozyma aphidis

Chia sẻ: Doan Van Lam | Ngày: | Loại File: PPT | Số trang:20

Thêm vào BST

Báo xấu

550
lượt xem 104
download

Download Vui lòng tải xuống để xem tài liệu đầy đủ

Nấm men có cấu tạo đơn bào và thường sinh sản bằng cách nảy chồi và phân cắt. Tế bào nấm men có hình elip, hình cầu, hình gậy... Kích thước của tế bào nấm men vào khoảng 8 - 15 μm. Tế bào nấm men gồm có Vỏ (thành), màng, tế bào chất, nhân, một hoặc 2 không bào. Nấm men có thể sinh sản bằng bào tử (1 – 12 bào tử).

Chủ đề:

Bình luận(0) Đăng nhập để gửi bình luận!

Lưu

Nội dung Text: Đề tài: Phân lập và tuyển chọn chủng thuần khiết, khảo sát ảnh hưởng nhiệt độ, pH và nguồn cacbon đối với chủng Pseudozyma aphidis

Báo cáo thực tập Đề tài: Phân lập và tuyển chọn chủng thuần khiết, khảo sát ảnh hưởng nhiệt độ, pH và nguồn cacbon đối với chủng Pseudozyma aphidis Cán bộ hướng dẫn : TS. Quản Lê Hà Sinh viên thực hiện : Đoàn Văn Lâm Lớp: CNSHB - K50
I. Mở đầu 1. Giới thiệu về nấm men Nấm men có cấu tạo đơn bào và thường sinh sản bằng cách nảy chồi và phân cắt. Tế bào nấm men có hình elip, hình cầu, hình gậy... Kích thước của tế bào nấm men vào khoảng 8 - 15 μm. Tế bào nấm men gồm có Vỏ (thành), màng, tế bào chất, nhân, một hoặc 2 không bào. Nấm men có thể sinh sản bằng bào tử (1 – 12 bào tử).
2. Đối tượng nghiên cứu Nấm men Pseudozyma aphidis thuộc lớp Nấm đảm dị hình, sinh sản bằng cách nảy chồi. Loại nấm men này được phân lập chủ yếu từ thực vật. Trong lần thực tập này vì thời gian có hạn nên em khảo sát định tính khả năng sinh trưởng, sinh bào tử của chủng nấm men này ở một số điều kiện (t0, pH) và các yếu tố dinh dưỡng như: nguồn xellulose, tinh bột, cacbua hydro…Từ nghiên cứu định tính này chúng ta biết được những ứng dụng mới của chủng nấm men Pseudozyma aphidis trong thực tiễn
II. Vật liệu và phương pháp nghiên cứu 1. Vật liệu 1.1. Chủng vi sinh vật nghiên cứu Chủng nấm men Pseudozyma aphidis từ bộ sưu tập giống của Viện công nghệ sinh học – Công nghệ thực phẩm, trường Đại học Bách Khoa Hà Nội được đặt tên là: L35
1.2. Hóa chất • KH2PO4 - Agar • MgSO4.7H2O - Pepton • NaCl - NH4)2SO4 • - Tinh bột FeSO4.7H2O • - Cao nấm men MnSO4.H2O • NH4NO3 - Glucose • CMC - K2SO4 • KCl - (NaH2PO4 • Na2HPO4
1.3. Máy và thiết bị - Nồi hấp tiệt trùng (Liên Xô cũ) - Tủ sấy (Đức) - Tủ cấy vô trùng (Trung Quốc) - Lò vi sóng - Máy so màu quang phổ UV - Máy lắc ổn nhiệt - Máy đo pH - Cân điện tử - Máy lắc vortex - Máy khuấy từ
2. Phương pháp nghiên cứu 2.1. Phương pháp cấy chuyển và bảo quản giống 2.2. Phân lập, chọn khuẩn lạc sạch, tiêu biểu Môi trường cao nấm men-thạch YEA: - 4g cao nấm men - 20g glucoza - 1 lít nước
2.3. Phương pháp xác định hoạt độ thuỷ phân enzim bằng cách quan sát vòng thủy phân của khuẩn lạc - Môi trường xác định hoạt tính amilase: - Pepton: 0.05% - KCl : 0.01% - MgSO4. 7H2O : 0.05% - (NH4)2SO4 : 0.01% - NaH2PO4 : 0.01% - Tinh bột : 2% : 0.8- 1% - Agar
Môi trường xác định hoạt tính xellulose : – MgSO4. 7H2O : 0.5g – NaCl : 0.5g – FeSO4.7H2O : 0.01g – MnSO4.H2O : 0.01g – NH4NO3 : 0.3g – CMC : 10g – Agar : 12g
2.4. Phương pháp nghiên cứu sự sinh trưởng của nấm men Pseudozyma aphidis L35 Khảo sát môi trường cacbua hydro khi: Có agar: - Na2HPO4 : 2g - K2SO4 : 0.17g - NH4NO3 : 4g - KH2PO4 : 0.53g - MgSO4.7H2O : 0.1g Agar : 5g
Không có agar: - KH2PO4 : 0.3g - MgSO4.7H2O : 0.4g - Na2HPO4 : 0.7g - Nước cất : 1lít
2.5. Nghiên cứu ảnh hưởng của nhiệt độ nuôi cấy đến sự sinh trưởng và phát triển của nấm men Pseudozyma aphidis 2.6. Nghiên cứu ảnh hưởng của pH ban đầu đến sự sinh trưởng và phát triển của nấm men Pseudozyma aphidis
III. Kết quả và thảo luận 3.1. Phân lập, chọn khuẩn lạc sạch tiêu biểu Hình ảnh khuẩn lạc nấm men P. aphidis khi quan sát ngày đầu tiên
Hình ảnh khuẩn lạc nấm men P. aphidis khi quan sát ngày thứ 3
3.2. Nghiên cứu ảnh hưởng của nhiệt độ nuôi cấy và pH ban đầu đến sự sinh trưởng và phát triển của nấm men Pseudozyma aphidis L35 Sự sinh trưởng (OD Nhiệt độ nuôi, 600nm) pH Ngày thứ Ngày Ngày thứ 4 thú 2 6 30oC pH=6 1.048 1.040 0.830 pH=7 1.280 1.258 1.207 35oC pH=6 0.949 0.941 0.912 pH=7 0.871 0.863 0.851
3.3. Khả năng thủy phân các nguồn cácbon khác nhau của chủng nấm men Pseudozyma aphidis 3.2.1. Khả năng thủy phân xellulose Hình ảnh vòng thủy phân CMC của chủng nấm men P. aphidis L35
3.2.2. Khả năng thủy phân tinh bột sắn . Hình ảnh vòng thủy phân tinh bột sắn của chủng nấm men P. aphidis L35
3.3. Nghiên cứu khả năng phân hủy nguồn cacbua hydro của chủng nấm men Pseudozyma aphidis L35 Khả năng phân hủy nguồn cacbua hydro của chủng nấm men Pseudozyma aphidis L35 khi có agar Sự sinh trưởng(OD 600nm) stt Tên môi trường Ngày đầu Ngày thứ 5 Ngày thứ 10 2 Không Oil + L35 0.033 0.034 0.036 4 Có Oil + L35 0.420 0.438 0.440
Khả năng phân hủy nguồn cacbua hydro của chủng nấm men Pseudozyma aphidis L35 khi có agar Sự sinh trưởng(OD 600nm) stt Tên môi trường Ngày đầu Ngày thứ 5 Ngày thứ 10 1 Không Oil + L35 0.091 0.006 0.001 2 Có Oil + L35 0.107 0.062 0.034
• TÀI LIỆU THAM KHẢO • Lê Thanh Mai, Nguyễn Thị Hiền, Phạm Thu Thủy, Nguyễn Thị Hằng, Lê Thị Lan Chi, 2005. Các phương pháp phân tích ngành công nghệ lên men. NXB Khoa học và kỹ thuật, Hà Nội • Nguyễn Văn Mùi, 2001. Thực hành hoá sinh học., NXB Khoa học và kỹ thuật Hà Nội • PGS.TS Lương Đức Phẩm, 1997. Công nghệ Vi sinh vật, NXB Nông nghiệp, Hà Nội • Đặng Thị Thu, Nguyễn Thị Xuân Sâm, Tô Kim Anh, 1997. Thí nghiệm hoá sinh công nghiệp. Bộ môn hoá sinh, Viện công nghệ sinh học và công nghệ thực phẩm, trường ĐHBKHN • Nguyễn Lân Dũng, Nguyễn Đình Quyến, 2003. Vi sinh vật học, NXB Giáo dục • Tangarone, B., Royer, J.C. and Nakas, J.P. (1989) Purification of an endo- (1,3)-D-glucanase from Trichoderma longibrachiatum. Appl Environ Microbiol 55: 177-184 • Abdullah, N. (2004) Strategies for expanded bed purification of recombinant protein. PhD Thesis, University of Cambridge, United Kingdom • Saha, B.C. (2003) production, purification and properties of endoglucanase from a newly isolated strain of Murcor circinelloides. Process Biochemistry, 39:1871-1876 • Wang, N.S (2003) Glucose assay by dinitrosalicylic colorimetric method • Central venous catheter infection associated with Pseudozyma aphidis in a child with short gut syndrome. Shau-Shau Lin,1 Thomas Pranikoff, Shani F. Smith, Mary E. Brandt, Kemery Gilbert, Elizabeth L. Palavecino and Avinash K. Shetty. Journal of Medical Microbiology (2008), 57, 516–518.