intTypePromotion=1
zunia.vn Tuyển sinh 2024 dành cho Gen-Z zunia.vn zunia.vn
ADSENSE
 » 
 » 

Khóa luận tốt nghiệp ngành Dược học: Phân tích thành phần Stipuleanosid R2 có trong các bộ phận của cây Sâm Vũ Diệp

Chia sẻ: Chuheo Dethuong25 | Ngày: | Loại File: PDF | Số trang:45

Thêm vào BST
Báo xấu
21
lượt xem 7
download
 
  Download Vui lòng tải xuống để xem tài liệu đầy đủ

Khóa luận được nghiên cứu với mục tiêu nhằm định tính và bước đầu định lượng thành phần stipuleanosid R2 trong các bộ phận của cây Sâm Vũ Diệp gồm: thân (trên mặt đất), lá và thân rễ. Mời các bạn cùng tham khảo!

Chủ đề:

Bình luận(0) Đăng nhập để gửi bình luận!

Lưu

Nội dung Text: Khóa luận tốt nghiệp ngành Dược học: Phân tích thành phần Stipuleanosid R2 có trong các bộ phận của cây Sâm Vũ Diệp

  1. ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI KHOA Y DƯỢC ======  ====== TRẦN THỊ NGỌC HÀ PHÂN TÍCH THÀNH PHẦN STIPULEANOSID R2 TRONG CÁC BỘ PHẬN CỦA CÂY SÂM VŨ DIỆP (Panax bipinnatifidus Seem.) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH DƯỢC HỌC Hà Nội - 2019
  2. ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI KHOA Y DƯỢC =======  ====== Người thực hiện: TRẦN THỊ NGỌC HÀ PHÂN TÍCH THÀNH PHẦN STIPULEANOSID R2 TRONG CÁC BỘ PHẬN CỦA CÂY SÂM VŨ DIỆP (Panax bipinnatifidus Seem.) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC (NGÀNH DƯỢC HỌC) Khóa: QH2014.Y Người hướng dẫn: GV.TS. NGUYỄN HỮU TÙNG Hà Nội - 2019
  3. PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterm MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN NU Danh mục ký hiệu và tên viết tắt Danh mục các bảng V Danh mục các hình vẽ và đồ thị y, ĐẶT VẤN ĐỀ ac CHƯƠNG 1 – TỔNG QUAN..................................................................................... 2 rm 1.1. Tổng quan về Sâm Vũ Diệp........................................................................... 2 ha 1.1.1. Tên khoa học......................................................................................... 2 dP 1.1.2. Đặc điểm thực vật................................................................................. 2 an 1.1.3. Đặc điểm phân bố và sinh thái..............................................................2 1.1.4. Thành phần hóa học.............................................................................. 3 ne 1.1.5. Tính vị, công năng.................................................................................8 ici 1.1.6. Tác dụng dược lý...................................................................................8 ed 1.1.7. Công dụng............................................................................................. 8 M 1.2. Tổng quan về Saponin....................................................................................9 of 1.3. Tổng quan về Stipuleanosid R2................................................................... 10 1.4. Tổng quan về một số nghiên cứu phân tích định tính và định lượng về ol thành phần hóa học trong Sâm Vũ Diệp............................................................. 11 ho 2. CHƯƠNG 2 - ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU.................. 14 Sc 2.1. ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU..................................................................... 14 t@ 2.1.1. Nguyên liệu......................................................................................... 14 2.1.2. Dung môi, hóa chất............................................................................. 14 h 2.1.3. Thiết bị................................................................................................ 14 rig 2.2. PHƯƠNG PHÁP.......................................................................................... 15 py 2.2.1. Phương pháp chiết xuất Sâm Vũ Diệp................................................15 Co `2.2.2. Phương pháp phân tích TLC..............................................................16
  4. PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterm 2.2.3. Phương pháp định lượng Stipuleanosid R2 bằng HPLC....................17 3. CHƯƠNG 3 - KẾT QUẢ...................................................................................... 25 NU 3.1. Chiết xuất saponin từ các bộ phận lá, thân, rễ Sâm Vũ Diệp...................... 25 3.2. Định tính bằng TLC thành phần Stipuleanosid R2 trong các bộ phận Sâm V Vũ Diệp................................................................................................................25 y, 3.3. Định tính thành phần Stipuleanosid R2 trong cao chiết từ các bộ phận Sâm ac Vũ Diệp bằng HPLC........................................................................................... 26 rm 3.4. Định lượng Stipuleanosid R2 trong các bộ phận Sâm Vũ Diệp bằng HPLC................................................................................................................... 27 ha 4. CHƯƠNG 4 - BÀN LUẬN................................................................................... 29 dP 4.1 Về chiết xuất và xác định thành phần saponin có trong các bộ phận của Sâm an Vũ Diệp................................................................................................................29 4.2. Về định lượng sơ bộ thành phần Stipuleanosid R2 trong các bộ phận của ne Sâm Vũ Diệp bằng HPLC................................................................................... 29 ici KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ................................................................................... 31 ed TÀI LIỆU THAM KHẢO......................................................................................... 33 M PHỤ LỤC...................................................................................................................35 of ol ho Sc h t@ rig py Co
  5. PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterm LỜI CẢM ƠN Trong thời gian tiến hành nghiên cứu và hoàn thiện đề tài cùng khóa luận, NU tôi đã nhận được sự hướng dẫn, hỗ trợ và giúp đỡ tận tình và tâm huyết của các thầy cô, các anh chị đi trước tại Khoa Y Dược-ĐHQGHN cùng với sự ủng hộ của V bạn bè và người thân gia đình. Qua đây, tôi xin trân trọng gửi lời cảm ơn chân thành tới những người đã luôn bên cạnh, dìu dắt, chỉ dạy và ủng hộ tôi trong quá y, trình thực hiện khóa luận. ac Trước hết, tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến PGS.TS Dương Thị Ly rm Hương, T.S Nguyễn Hữu Tùng - Khoa Y Dược ĐHQGHN, thầy cô đã dành thời ha gian để trực tiếp hướng dẫn, chỉ bảo tận tình, truyền đạt cho tôi những kinh nghiệm quý báu và động viên tôi trong suốt quá trình hoàn thiện khóa luận của mình. Tôi dP xin cảm ơn sâu sắc tới anh Nguyễn Hoàng Việt ; chị Đặng Thị Ngần - Khoa Y Dược ĐHQGHN, những người tiền bối đã luôn bên cạnh tôi trong suốt quá trình an thực nghiệm tại labo, giúp tôi khắc phục những sai sót hay vượt qua những khó khăn thất bại trong qúa trình thí nghiệm. ne Tôi cũng xin gửi lời cảm ơn đến Ban chủ nhiệm Khoa, các thầy cô trong ici Khoa Y Dược, đặc biệt là bộ môn Hóa dược và Kiểm nghiệm thuốc đã luôn tạo ed điều kiện cho tôi thực hiện khóa luận này. M Tôi xin chân thành cảm ơn tập thể Dược học khóa QH.2014.Y, đặc biệt là các bạn Nông Mỹ Hoa, Nguyễn Thị Hồng Nhung, Cao Thị Phương Thảo, Bùi Thị of Thanh Vân đã đồng hành cùng tôi trong suốt thời gian nghiên cứu. ol Và cuối cùng, tôi xin gửi lời cảm ơn đến gia đình thân yêu và bạn bè đã ở bên ủng hộ tôi trong cả quá trình học tập, phấn đấu để đạt được thành tích như ngày ho hôm nay. Sc Hà Nội, ngày 09 tháng 05 năm 2019 t@ Sinh viên Trần Thị Ngọc Hà h rig py Co
  6. PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterm Danh mục ký hiệu và tên viết tắt Ký hiệu Tên đầy đủ NU EtOH Ethanol V HPLC Sắc ký lỏng hiệu năng cao HPLC-DAD Sắc ký lỏng hiệu năng cao đầu dò mảng diod y, ac MeOH Methanol rm LOD Giới hạn phát hiện LOQ Giới hạn định lượng ha RDS Độ lệch chuẩn tương đối dP SVD Sâm vũ diệp an TLC Sắc ký lớp mỏng TLTK Tài liệu tham khảo ne TPHH Thành phân hóa học ici TT Thuốc thử ed UV Tử ngoại M UV-DAD UV-detector aray diode of ol ho Sc ht@ rig py Co
  7. PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterm Danh mục các bảng Bảng 1.1. Các thành phần hóa học đã nghiên cứu trong Sâm Vũ Diệp............... 7 NU Bảng 1.2. Điều kiện sắc ký và kết quả phân tích định tính, định lượng acid oleanolic trong dược liệu Sâm Vũ Diệp............................................................. 12 V Bảng 1.3. Chương trình pha động chạy HPLC-DAD.........................................13 y, Bảng 2.1. Chương trình dung môi chạy HPLC-DAD........................................ 18 ac Bảng 3.1. Hàm lượng cắn các phân đoạn chiết xuất từ thân rễ Sâm Vũ Diệp... 25 rm Bảng 3.2. Hàm lượng cắn phân đoạn chiết xuất từ lá và thân Sâm Vũ Diệp.....25 ha Bảng 3.3. Tính thích hợp của hệ thống sắc ký....................................................19 dP Bảng 3.4. Kết quả khảo sát khoảng tuyến tính của stipuleanosid R2.................20 Bảng 3.5. Kết quả khảo sát độ lặp lại của phương pháp.....................................21 an Bảng 3.6. Khảo sát độ thu hồi............................................................................. 22 ne Bảng 3.7. Kết quả định lượng stipuleanosid R2 trong thân rễ SVD.................. 27 ici Bảng 3.8. Kết quả định lượng stipuleanosid R2 trong thân và lá SVD..............28 ed M of ol ho Sc ht@ rig py Co
  8. PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterm Danh mục các hình vẽ và đồ thị Hình 1.1 . Đặc điểm hình thái Sâm Vũ Diệp........................................................ 2 NU Hình 1.2 . Đặc điểm thực vật và vùng phân bố Sâm Vũ Diệp............................. 3 Hình 1.3 . Cấu trúc hóa học của 10 saponin tách được từ rễ SVD.......................5 V Hình 1.4 . Cấu trúc hóa học của β-sitosterol, oleanolic acid và daucosterol....... 5 y, Hình 1.5 . Cấu trúc hóa học của Stipuleanosid R2(a) và Aralosid A methyl(b) ac ester........................................................................................................................ 6 rm Hình 1.6 . Thành phần saponin thuộc nhóm triterpenoid có trong Sâm Vũ Diệp.10 ha Hình 1.7 Công thức cấu tạo của Stipuleanosid R2............................................ 11 dP Hình 2.1 . Mẫu dược liệu Sâm Vũ Diệp............................................................. 14 Hình 2.2 . Sơ đồ quy trình chiết.......................................................................... 16 an Hình 2.3 . Dịch lọc rễ, thân, lá SVD................................................................... 16 ne Hình 3.1 . Sắc ký đồ dung dịch mẫu trắng, mẫu chuẩn và mẫu thử...................19 ici Hình 3.2 . Đồ thị biểu diễn đường chuẩn của stipuleanosid R2......................... 21 ed Hình 3.3 . Kết quả TLC Stipuleanosid R2 của các bộ phận dược liệu Sâm Vũ Diệp......................................................................................................................26 M Hình 3.4 . Sắc ký đồ HPLC của stipuleanosid R2 (A) và các mẫu cao của thân of rễ (B), thân và lá (C) Sâm Vũ Diệp (Panax bipinnatifidus Seem.).................... 26 ol Hình 3.5 . Sắc ký đồ cao tổng lá và thân SVD....................................................28 ho Sc ht@ rig py Co
  9. PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterm ĐẶT VẤN ĐỀ Sâm Vũ Diệp (Panax bipinnatifidus Seem., họ Nhân sâm - Araliaceae) là NU một trong những cây thuốc quý phân bố ở Trung Quốc và dãy núi Hoàng Liên Sơn Tây Bắc nước ta [9]. Gần đây Sâm Vũ Diệp (SVD) đã được thuần hóa và bước đầu V được trồng thử nghiệm ở một số địa phương ở Hà Giang, Lào Cai. Về mặt y học, SVD được sử dụng làm thuốc bổ và là thành phần trong một số bài thuốc truyền y, thống của các dân tộc vùng núi Tây Bắc. Theo các tài liệu cũng như các nghiên cứu ac trước [2,12] cho thấy dược liệu SVD đang được sử dụng là phần thân rễ, chứa hàm rm lượng lớn saponin-Stipuleanosid R2-thành phần hoạt chất chính mang lại tác dụng dược lý và giá trị sử dụng của dược liệu quý này trong y học. Tuy nhiên, chưa có ha công bố chính thức nào về thành phần saponin này trong bộ phận trên mặt đất của dP SVD. Do đó, việc tập trung nghiên cứu thành phần saponin trong các bộ phận SVD cũng như định lượng được thành phần đó có ý nghĩa rất quan trọng trong việc ứng an dụng dược liệu SVD trong thực tiễn. Vậy liệu trong các bộ phận khác trên mặt đất của SVD (lá, thân, hoa) có chứa thành phần saponin như phần (dưới mặt đất) thân ne rễ hay không? Nếu có thì hàm lượng là bao nhiêu? Có thể sử dụng các bộ phận đó ici thay thế dược liệu SVD được không? Để trả lời những câu hỏi trên, đồng thời đóng góp vào việc nghiên cứu một ed cách có hệ thống về saponin và xây dựng các tiêu chí định tính, định lượng, cơ sở M dữ liệu về hóa thực vật và tiêu chuẩn hóa dược liệu SVD; chúng tôi thực hiện đề tài “Phân tích thành phần Stipuleanosid R2 có trong các bộ phận của cây Sâm Vũ of Diệp” tiếp nối nghiên cứu bước đầu về thành phần hóa học của thân rễ SVD và ol “Nghiên cứu thành phần saponin có trong thân rễ của SVD trồng ở Sa Pa”-luận văn thạc sĩ Nguyễn Thị Thu Thủy [12], với các mục tiêu định tính và bước đầu định ho lượng thành phần stipuleanosid R2 trong các bộ phận của cây Sâm Vũ Diệp gồm: Sc thân (trên mặt đất), lá và thân rễ. h t@ rig py Co 1
  10. PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterm CHƯƠNG 1 – TỔNG QUAN 1.1. Tổng quan về Sâm Vũ Diệp NU 1.1.1. Tên khoa học Sâm Vũ Diệp có tên khoa học là Panax bipinnatifidus Seem. [1], SVD thuộc V chi Sâm (Panax. L), họ Ngũ gia bì (Araliaceae) [2]. y, 1.1.2. Đặc điểm thực vật ac Sâm Vũ Diệp là cây thân thảo sống nhiều năm, ưa bóng và đặc biệt ưa ẩm. rm Thân rễ dài có nhiều đốt và những vết sẹo do thân rụng hàng năm để lại. Thân khí sinh mảnh, cao 20 - 30 cm, thường đơn độc, mọc thẳng, rỗng giữa, có vạch dọc, ha thường lụi vào mùa đông, mọc chồi thân mới từ giữa tháng 2 đến đầu tháng 3 dP dương lịch. Lá kép chân vịt, gồm 2 - 3 cái mọc vòng. Lá chét 5 - 7 (ít khi 3) thuôn, dài 2,5 - 14 cm, rộng 1,5 - 4 cm, gốc tròn, đầu thuôn thành mũi nhọn, xẻ thùy không đều, mép có răng cưa, có lông [1]. an ne ici ed M of Hình 1.1. Đặc điểm hình thái Sâm Vũ Diệp ol ho 1.1.3. Đặc điểm phân bố và sinh thái Trong tự nhiên, SVD phân bố ở Trung Quốc, Ấn Độ và Nepan (vùng cận Sc Hymalaya) và dãy núi Hoàng Liên Sơn, Tây Bắc nước ta [1]. Sa Pa-Việt Nam cũng t@ là điểm phân bố cuối cùng của SVD ở phía nam. Năm 1973, cây đã được phát hiện ở núi Hàm Rồng, sát thị trấn Sa Pa, ở độ cao 1600 m. Hiện nay vùng phân bố của SVD đã bị thu hẹp dần, từ độ cao khoảng 1800 m trở lên, cây được coi là cực hiếm h rig [1]. Gần đây SVD đã được thuần hóa và bước đầu được trồng thử nghiệm ở một số địa phương ở Hà Giang và Lào Cai [18]. py Co 2
  11. PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterm V NU y, ac rm ha Hình 1.2. Đặc điểm thực vật và vùng phân bố Sâm Vũ Diệp. Sâm Vũ Diệp thường mọc rải rác hay tập trung (vài chục khóm) dưới tán dP rừng ẩm, gần như quanh năm có sương mù. Đất nơi có SVD mọc được xác định là feralit có mùn, có những chỗ SVD mọc lần với thảm rêu dày trên hốc đá hay ở gốc an cây gỗ lớn. SVD còn là cây ưa khí ẩm mát. Các chỉ số về khí hậu ở Trạm quan trắc ne đèo Hoàng Liên Sơn, cho thấy SVD đã tồn tại và phát triển vững bền từ bao đời nay trong một điều kiện khí hậu có nền nhiệt độ khá thấp (nhiệt độ trung bình năm ici 12.8°C, lượng mưa: 3552 mm/năm; lượng bốc hơi là 494 mm/năm và độ ẩm không ed khí và độ ẩm không khí trung bình khoảng 90%..) M Hàng năm vào cuối tháng 2 đầu tháng 3, từ phần đầu mầm thân rễ phân nhánh ngang nằm sát mặt đất sẽ mọc lên một hoặc vài chồi thân (tùy thuộc vào số of đầu mầm thân rễ phân nhánh). Chồi này sinh trưởng nhanh trong vòng một tháng đã ra lá và gần đạt được chiều cao cực đại. Đến tháng 4, mỗi thân mang lá có thể ol cho ra một cụm hoa. Quả xanh quan sát được vào cuối tháng 4 – 6, đến tháng 7 quả ho đã chín và rụng xuống xung quanh gốc cây mẹ. Do quả chín đúng vào thời kì có Sc lượng mưa lớn tháng 7 – 8 nên hạt giống thường bị cuốn trôi, ảnh hưởng đến khả năng tái sinh tự nhiên của SVD. Sau khi quả chín, từ tháng 9 – 10, toàn bộ phần t@ thân mặt đất tàn lụi qua mùa đông, để lộ những vết sẹo thân rễ khá rõ. Đó là dấu hiệu giúp ta xác định tuổi của cây [1]. h 1.1.4. Thành phần hóa học rig Hiện tại các nghiên cứu về Sâm Vũ Diệp chưa nhiều, song hầu hết các kết py quả nghiên cứu đều cho thấy thành phần hóa học mang hoạt tính chính của SVD là Saponin. Trần Công Luận và cộng sự năm 2009, đã định lượng saponin tổng số của Co thân rễ và rễ củ của SVD theo phương pháp trọng lượng của Namba là 5,86% [7]. 3
  12. PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterm Trong lá và thân rễ Sâm Vũ Diệp được các nhà nghiên cứu xác định có chứa thành phần chính là các Saponin khung oleanan với hàm lượng tương đối cao cùng với NU một số saponin khung dammaran với hàm lượng thấp hơn [11,12]. Năm 1989, nhóm nghiên cứu Trung Quốc công bố phân lập 13 saponin V khung dammaran từ lá của cây này ở Trung Quốc trong đó bao gồm một số ginseng saponin đặc trưng như ginsenosid F1, F2, F3, Rg2, Rb, Rd, Re và Rb3 y, [17].Thân rễ SVD chứa saponin thuộc nhóm oleanan gồm những chất như ac chikusetsusaponin IV, zingibrosid R1, ginsenosid Ro, Rb1, Rd, Re, Rg1 và Rg2 [1]. rm Ở Việt Nam, nghiên cứu về TPHH của SVD còn khá mới mẻ. Nghiên cứu ha của Trần Công Luận và cộng sự năm 2002, kết quả định tính sơ bộ cho thấy trong thân rễ và rễ củ SVD có chứa hai nhóm chất chính là polyacetylen và saponin cùng dP với acid béo, acid amin. Đồng thời bằng cách thủy phân saponin rồi kết tinh sapogenin toàn phần thu được acid oleanolic [7,8]. an Năm 2011, nhóm nghiên cứu Việt Nam-Hàn Quốc đã phân lập và xác định ne được một nhóm gồm 10 saponin khung oleanan (1-10, hình 1.2) là thành phần chính của rễ cây SVD được thu hái ở núi Hoàng Liên Sơn (Việt Nam), trong đó có ici 3 chất mới bifinosid A-C (1-3) [3]. ed M of ol ho Sc 1: Ara(p) H H Me H t@ 2: H Xy (1→6) H Me H gc h 3: Xy Ara(p) H Me Gc rig 4: H H Ara(p) Me H py 5: H H H Me Gc Co 6: Xy H H Me H 4
  13. PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterm 7: H Gc Ara(f) H H 8: Xy H H Me Gc NU 9: Xy Ara(p) H H Gc 10: H Gc Ara(f) Me Gc V Me: methyl y, ac Ara(f): α-L-arabinofuranosy Ara(p): α-L-arabinopyranosy rm G c: β-D-g ucopyranosy ha Xy: β-D-xy opyranosy dP Hình 1.3. Cấu trúc hóa học của 10 saponin tách được từ rễ SVD an Đỗ Văn Hào năm 2017, đã phân lập và xác định được cấu trúc hóa học 3 hợp chất β-sitosterol, oleanolic acid và daucosterol từ phân đoạn ethyl acetat thân ne rễ SVD [4]. ici ed M β-sitosterol Oleanolic acid of ol ho Sc Daucostero t@ Hình 1.4. Cấu trúc hóa học của β-sitosterol, oleanolic acid và daucosterol. Năm 2018, Thạc sỹ Nguyễn Thu Thủy đã phân lập và xác định được cấu trúc h rig hóa học của 2 hợp chất khác có trong thân rễ SVD là stipuleanosid R2 , aralosid methyl ester [12]. py Co 5
  14. PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterm V NU y, ac rm ha dP an a) Stipuleanosid R2. ne ici ed M of ol ho Sc b) Aralosid A methyl ester. t@ Hình 1.5. Cấu trúc hóa học của Stipuleanosid R2(a) và Aralosid A methyl(b) ester. Như vậy, tổng cộng có 23 hợp chất saponin đã được xác định từ các phần h của cây SVD có liên quan đến tác dụng sinh học. rig py Co 6
  15. PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterm Bảng 1.1. Các thành phần hóa học đã nghiên cứu trong Sâm Vũ Diệp STT Hợp chất TLTK NU 1 24(S)-pseudoginsenosid F11 [15] V 2 Bifinosid A [14] y, 3 Bifinosid B [14] ac 4 Bifinosid C [14] rm 5 Bipinnatifidusosid F1 [15] 6 Bipinnatifidusosid F2 [15] ha 7 Chikusetsusaponin IVa [13] dP 8 Ginsenosid F [15] 9 Ginsenosid F2 an [15] ne 10 Ginsenosid F3 [15] ici 11 Ginsenosid Rb1 [15] 12 Ginsenosid Rb3 [15] ed 13 Ginsenosid Rd [15] M 14 Ginsenosid Re [15] of 15 Ginsenosid Rg1 [15] ol 16 Ginsenosid Rg2 [15] ho 17 Majorosid F1 [15] Sc 18 Momordin IIe [13] t@ 19 Narcissiflorin methyl este [13] 20 Panasenosid [13] h 21 Pseudoginsenosid RT1 methyl este [13] rig 22 Stipuleanosid R1 [13] py 23 Stipuleanosid R2 methyl este [13] Co 7
  16. PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterm Nhận xét: Các kết qủa nghiên cứu bước đầu chỉ ra rằng saponin Stipuleanosid R2 là thành phần chính trong dược liệu SVD (thân rễ) với hàm lượng NU tương đối cao cùng một số saponin khung dammaran với hàm lượng thấp hơn [1,7,12,14]. Song các nghiên cứu chỉ mới thực hiện chủ yếu trên đối tượng là thân V rễ của SVD mà chưa có nhiều báo cáo về các thành phần có trong các bộ phận khác như lá, phần thân trên mặt đất của cây. Do đó từ tổng quan về TPHH của SVD đã y, trình bày, đề tài định hướng nghiên cứu phân tích TPHH của các bộ phận thân, lá, ac thân rễ SVD trồng ở Sa Pa, đặc biệt là thành phần Stipuleanosid R2 với mục đích rm so sánh về thành phần và hàm lượng thành phần này giữa các bộ phận. Từ đó cung cấp cơ sở khoa học cho dược liệu SVD trồng ở Việt Nam. ha 1.1.5. Tính vị, công năng dP Tính vị, công năng: SVD có vị đắng, ngọt, tính hơi ấm, có tác dụng dưỡng huyết, hoạt lạc, chỉ huyết, tán ứ [1]. 1.1.6. Tác dụng dược lý an ne Một số nghiên cứu về tác dụng dược lý của SVD cho thấy khi thử trên động ici vật thí nghiệm, SVD có độc tính cấp rất thấp, tăng cường chức năng sinh lý, ảnh hưởng tốt đến hệ thần kinh trung ương, tăng sức dẻo dai của cơ thể, tăng sức đề ed kháng, tác dụng tán huyết [1]. Bên cạnh đó một số Saponin có tác dụng dược lý M như: chống viêm, chống oxi hóa, chống ung thư, bảo vệ tim mạch, chống tiểu đường, bảo vệ tế bào thần kinh, …có thể phần nào giải thích cho lợi ích về mặt of dược học trong việc sử dụng SVD trong y học truyền thống [16]. ol Nghiên cứu của Nguyễn Thị Thu Hương và cộng sự đã chỉ ra rằng SVD có tác dụng chống stress, chống trầm cảm, có tác dụng bảo vệ gan và kích thích tăng ho miễn dịch [5] Sc 1.1.7. Công dụng t@ Từ xa xưa, dân gian đã dùng SVD làm thuốc bổ huyết, chủ yếu cho phụ nữ sau sinh và người cao tuổi. SVD còn được dùng ngoài, bôi lên các vết thương để cầm máu, tán ứ, tiêu sưng, làm lành vết thương nhanh. Bên cạnh đó SVD còn được h rig dân gian sử dụng như một thực phẩm tăng cường sinh lực, kích thích sinh dục bằng cách ngâm rễ SVD rồi chiết dưới dạng tinh sâm, rất tốt cho sức khỏe [1]. py Co 8
  17. PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterm Trong y học cổ truyền Việt Nam, thân rễ của SVD đã được sử dụng như một loại thuốc bồi bổ tinh thần và thể chất, cải thiện trí nhớ, giảm nguy cơ ung thư và NU làm giảm đường huyết ở bệnh nhân tiểu đường [3]. Ở Trung Quốc, SVD còn được dùng làm thuốc chữa lao, chảy máu cam, thổ V huyết, đòn ngã tổn thương [1]. y, 1.2. Tổng quan về Saponin ac Saponin còn gọi là saponosid là một nhóm glycoside với phần genin có cấu rm trúc triterpene hay steroid 27 Cacbon gặp nhiều trong thực vật; ở động vật tìm thấy nhiều trong Sao Biển, Hải Sâm. Theo truyền thống, saponin thường được định ha nghĩa dựa trên một số tính chất chung đặc trưng của nhóm hợp chất này bao gồm: dP  Làm giảm sức căng bề mặt, tạo bọt nhiều khi lắc với nước.  Làm vỡ hồng cầu ngay cả khi ở nồng độ loãng.  an Độc với cá, diệt các loài thân mềm như giun, sán, ốc sên… ne  Kích thích niêm mạc mắt gây hắt hơi, đỏ mắt. ici  Có thể tạo phức với cholesterol hoặc với các chất 3β-hydroxysteroid. ed Tuy nhiên không phải tất cả steroid đều thể hiện tất cả tính chất trên. Cấu trúc của Saponin cũng như các glycosid khác, gồm có 2 phần là phần M đường và phần aglycon (còn được gọi là sapogenin). Saponin có cấu trúc triterpen of với khung cơ bản 30C hoặc steroid với khung cơ bản 27C dẫn xuất từ khung cholestan. Trên các khung cơ bản của sapogenin các sapogenin khác nhau bởi mức ol độ oxi hóa trên khung hay vị trí, số lượng của các nhóm thế. Nhóm thế trong ho sapogenin thường là hydroxyl, đôi khi gặp nhóm oxo hay sulfat. Nhóm OH có thể tự do hay glycosid hóa với đường. Một vài trường hợp nhóm có thể được acyl hóa Sc với các acid hữu cơ. Số lượng và vị trí nhóm thế trên khung cũng không nhiều. Ở vị trí C3 của sapogenin gần như luôn có nhóm OH. Nhóm OH này trong đa số t@ trường hợp có định hướng β. Đây cũng là vị trí gắn với đường của đa số saponin. Với số lượng không nhiều các sapogenin, sự đa dạng của saponin chủ yếu do thành h rig phần, số lượng và vị trí của các đường trong phân tử. Ngoài ra, còn có thể gặp các dây nối trên khung. py Đa số saponin có từ 1-2 mạch đường (được gọi là monodesmosid và Co bidesmosid). Ở các monodesmosid, phần đường gắn vào sapogenin hầu hết là ở vị 9
  18. PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterm trí C-3 bằng dây nối glycosid. Saponin có thể có thêm mạch đường thứ hai. Tổng số đơn vị đường trong một saponin có thể tới 11 đơn vị, nhưng số đường trên một NU mạch được biết tới nay tối đa là 8. Số đơn vị đường trong saponin thường là 1-4 đường. Đường trong saponin là các đường thông thường như β-D-glucose, β-D- V xylose, α-L-rhamnose và α-L-arabinose… [11]. Dựa trên cấu trúc hóa học của phần genin người ta chia saponin thành 2 y, nhóm lớn là saponin triterpenoid và saponin steroid; mỗi nhóm lại được chia thành ac nhiều nhóm nhỏ [11]. Nhiều công trình nghiên cứu trước đây đã cho thấy thành rm phần chính của thân rễ và rễ củ của cây SVD là saponin thuộc nhóm triterpenoid khung oleanan với phần sapogenin đã được xác định là acid oleanolic [1]. ha dP an ne ici ed Hình 1.6. Thành phần saponin thuộc nhóm triterpenoid có trong Sâm Vũ Diệp. M 1.3. Tổng quan về Stipuleanosid R2 of Stipuleanosid R2 là một hoạt chất saponin quan trọng, thành phần mang hoạt tính, đang tiếp tục được sự quan tâm nghiên cứu của các nhà khoa học, hợp ol chất này được phân lập trong một số dược liệu như: Sâm Vũ Diệp, Tam Thất hoang, ho Aralia taibaiensis [14], Aralia elata [17] … Sc ht@ rig py Co 10
  19. PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterm V NU y, ac rm ha Hình 1.7 Công thức cấu tạo của Stipuleanosid R2 dP Tên khoa học theo hệ thống IUPAC: (2S,3S,4R,5R,6R)-6- an [[(3S,4aR,6aR,6bS,8aS,12aS,14aR,14bR)-4,4,6a,6b,11,11,14b-heptamethyl-8a- [(2S,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxycarbonyl- ne 1,2,3,4a,5,6,7,8,9,10,12,12a,14,14-tetradecahydropicen-3-yl]oxy]-3[(2S,3R,4R,5S)- ici 3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]oxy-5-hydroxy-4- ed [(2S,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxyoxane-2- M carboxylic acid [16]. Công thức phân tử: C53H84O23 [19]. of Phân tử lượng: 1089.232 g/mol [19]. ol Tính chất lý hóa: Chất bột màu trắng, độ tan: 0,57 g/L, điểm nóng chảy ho 210 - 215 0C [19]. 1.4. Tổng quan về một số nghiên cứu phân tích định tính và định lượng về Sc thành phần hóa học trong Sâm Vũ Diệp t@ Trần Công Luận và cộng sự năm 2009, đã định lượng saponin tổng số của thân rễ và rễ củ của Sâm vũ diệp theo phương pháp trọng lượng của Namba là h 5,86% [7]. rig Năm 2017, Đỗ Văn Hào và Nguyễn Thị Huệ đã tiến hành khảo sát và lựa chọn điều kiện sắc ký và xây dựng phương pháp định tính, định lượng acid py oleanolic trong dược liệu SVD bằng phương pháp HPLC–DAD. Điều kiện sắc ký Co và kết quả phân tích định tính, định lượng như bảng 1.2. 11
  20. PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterm Bảng 1.2. Điều kiện sắc ký và kết quả phân tích định tính, định lượng acid oleanolic trong dược liệu Sâm Vũ Diệp NU - Cột sắc ký: Agilent Eclipse Plus C18 (ϕ 4,6 × 100 mm; cỡ hạt 3,5μm) V - Pha động: MeOH - Acid acetic 0,15%/H2O (85:15, v/v) y, - Detector UV-DAD phát hiện ở bước sóng: 203 nm - Tốc độ dòng: 1 ac ml/phút rm - Thể thích bơm mẫu: 20 µl - Nhiệt độ phân tích: nhiệt độ phòng ha - Dung môi pha mẫu: Methanol dP Định tính: Kết quả phân tích Định lượng: Kết quả cho thấy an dung dịch thử (cao tổng ethanol) hàm lượng acid oleanolic trong cao có pic oleanolic acid xuất hiện ở SVD và dược liệu SVD lần lượt là: ne thời gian lưu tR=10,485 phút tương 0,034% và 0,0066% [12]. tự như thời gian lưu của pic ici oleanolic acid chuẩn (tR=10,690 ed phút) [4]. M Năm 2018, Nguyễn Thị Thu Thủy đã xác định và định lượng thành phần of chính stipuleanosid R2 trong mẫu thân rễ SVD nghiên cứu trong đề tài là 0,49% bằng phương pháp HPLC-DAD được thực hiện trong điều kiện như sau: ol Máy sắc ký lỏng hiệu năng cao Agilent 1260 Infinity. ho  Cột sắc ký: Agilent Eclipse Plus C18 (ϕ 4,6 × 100 mm; cỡ hạt 3,5μm). Sc   Detector DAD phát hiện ở bước sóng 203 nm. t@  Tốc độ dòng: 0,8 ml/phút.  Thể thích bơm mẫu: 20 µl. h rig  Nhiệt độ: 25℃. Dung môi pha mẫu: Methanol. py   Pha động: Acetonitril (kênh A): 0,5% acid acetic/H2O (kênh B) với chương Co trình gradient như bảng 1.3. 12
ADSENSE

CÓ THỂ BẠN MUỐN DOWNLOAD

LV.15: Bộ Đồ Án Tốt Nghiệp Chuyên Ngành Cơ Khí
65 tài liệu
2431 lượt tải
THÔNG TIN
TRỢ GIÚP
HỖ TRỢ KHÁCH HÀNG
Theo dõi chúng tôi

Chịu trách nhiệm nội dung:

Nguyễn Công Hà - Giám đốc Công ty TNHH TÀI LIỆU TRỰC TUYẾN VI NA

LIÊN HỆ

Địa chỉ: P402, 54A Nơ Trang Long, Phường 14, Q.Bình Thạnh, TP.HCM

Hotline: 093 303 0098

Email: support@tailieu.vn

Giấy phép Mạng Xã Hội số: 670/GP-BTTTT cấp ngày 30/11/2015 Copyright © 2022-2032 TaiLieu.VN. All rights reserved.

 

Đồng bộ tài khoản
7=>1